一、试验用途及原理：
用于食品和其他物质中梭菌的培养和计数。
胰酪蛋白胨，牛肉浸粉，蛋白胨，可溶性淀粉，酵母浸粉和L-半胱氨酸盐提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；刃天青是氧化还原指示剂；醋酸钠可抑制革兰氏阴性菌；柠檬酸铁铵和亚硫酸钠是硫化氢指示剂；琼脂是培养基凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
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胰酪蛋白胨 |
5.0 |
|
蛋白胨 |
5.0 |
|
牛肉浸粉 |
8.0 |
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可溶性淀粉 |
1.0 |
|
酵母粉 |
1.0 |
|
葡萄糖 |
1.0 |
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L-半胱氨酸盐酸盐 |
0.5 |
|
醋酸钠 |
5.0 |
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刃天青 |
0.002 |
|
柠檬酸铁铵 |
0.5 |
|
亚硫酸钠 |
0.75 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH 7.6±0.2 25℃ |
|
三、试验方法：
粉体装培养基的使用：
1. 称取本品 42.75g，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，分装， 121℃高压灭菌15分钟，备用。
2. 制备质控菌液。
3. 吸取合适稀释度质控菌液1ml加入无菌平皿内，每个稀释度做两个平行。每个平皿倾注冷却至50℃的待测培养基15ml，缓慢旋转平皿，使质控菌液和培养基充分混匀。
上述琼脂平板凝固后，再加入10ml冷却至50℃的待测培养基均匀覆盖平板表层。
4. 待琼脂凝固后，正置于厌氧培养装置内36±1℃培养24-48小时，记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株，正置于厌氧培养装置内36±1℃培养24-48小时：
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
|
产气荚膜梭菌 |
ATCC13124 |
20-200 |
TSC |
定量 |
PR≥0.7 |
黑色菌落 |
图1-1 强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)微生物质控结果
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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