单克隆抗体的制备与应用

  （一）单克隆抗体的制备  
   单克隆抗体的制备过程如下：用事先设计好的抗原免疫动物（通常是小鼠或大鼠）， 使特异B细胞克隆繁殖并产生大量抗体。然后取出富含B淋巴细胞的脾，加入聚乙二醇与骨髓瘤细胞融合，再放入HAT［次黄嘌呤、叶酸和胸腺嘧啶核苷］培养基 中培养，叶酸封锁细胞 的特殊代谢用途，未融合的骨髓瘤细胞，缺乏使其能在叶酸存在下生长的酶，故不能生长而死亡；而未融合的脾B细胞，虽然具有对中间代谢产物次黄嘌呤和胸腺嘧啶的旁路途径，但却不能在体外培养基中生长，而在培养1—2周后也会 自然死亡。只有经过融合的杂交瘤细胞能够从融合的同伴细胞那里获得进行上述特定旁路途径代谢的遗传信息，而在HAT培养基中生 长。细胞经过融合过程以后，将单个融合细胞杂交瘤放在微量滴定板的加样孔中，逐孔检测其分泌产生抗体的能力，以确定能产生实验目标的抗体的杂交瘤细胞。一旦确定杂交瘤细胞以后，它们或被放在HAT培养基中培养或被注射到小鼠体内，作为鼠骨髓肿瘤而永久保存，也可以将它们冷冻，待用时再解冻，重新培养或注射到小鼠体内。 
（二）单克隆抗体的应用 
    单克隆抗体称为第三代抗体，被誉为“免疫学中的技术革命”，已被广泛应用于许多领域，并已取得令人瞩目的成果。在科研和药学研究中，它是重要的研究试剂，可以用来识别、检测和分离外来的抗原；在疾病的临床诊断中，它是非常灵敏的鉴定方法，常用于各种传染病的临床诊断，如乙型肝炎、衣原体疾病等的诊断；在疾病治疗中，它是有力的治疗武器，已被制成“药物导弹”，成功应用于某些肿瘤疾病的治疗，或大大降低毒素对正常细胞的伤害。目前 已制成了针对淋巴瘤、肝癌、结肠癌、乳腺癌和骨癌等10余种癌症的单克隆抗体。 

 

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