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粪肠球菌琼脂培养基的原理和使用方法

张宇名
录入时间:2023-1-29 16:08:45 来源:青岛海博生物

一、试验用途及原理

  本培养基用于粪肠球菌选择性分离培养。

  䏡胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖、乳糖为可发酵糖类;甘油磷酸钠为培养基碳源,也起到一定的缓冲作用;氯化钠维持细菌平衡的渗透压;叠氮钠可抑制革兰氏阴性菌生长;溴甲酚紫为指示剂染料;琼脂是凝固剂。粪肠球菌能将TTC(氯化三苯基四氮唑)还原成一种酸性的偶氮染料,显示为深红色菌落。


二、培养基配方(g/L)

䏡胨

10.0

麦芽糖

20.0

酵母浸粉

10.0

甘油磷酸钠

10.0

氯化钠

5.0

乳糖

1.0

溴甲酚紫

0.015

叠氮钠

0.4

TTC

0.1

琼脂

13.0

pH7.3±0.2(25℃)


三、试验方法

  1、称取本品70.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,煮沸5分钟,冷至50℃左右,倾入无菌平皿,备用。

  2、制备菌种悬液,接种到粪肠球菌琼脂培养基上。

  3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养48 h。


四、质控结果

  接种以下质控菌株,放置36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养48 h。菌株划线培养结果见图1,菌株涂布培养结果见图2。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

回收率

生长情况

其他特征

粪肠球菌

ATCC 29212

10-100

≥50%

+++

淡红色小菌落

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

/

/

-

抑制

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

/

/

-

抑制

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

/

/

-

抑制


粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果(划线培养)

图1 粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果(划线培养)

粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果(涂布培养)

图2 粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果(涂布培养)


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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