一、用途及试验原理
本培养基用于粪链球菌选择性分离培养及计数。
䏡蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；麦芽糖、乳糖为可发酵糖类；甘油磷酸钠为培养基碳源，也起到一定的缓冲作用；氯化钠维持细菌平衡的渗透压；叠氮钠可抑制革兰氏阴性菌生长；溴甲酚紫为指示剂染料；琼脂是凝固剂。粪链球菌能将TTC（氯化三苯基四氮唑）还原成一种酸性的偶氮染料，显示为深红色菌落。
二、培养基配方（g/L）
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䏡蛋白胨 |
10.0 |
|
酵母浸粉 |
10.0 |
|
甘油磷酸钠 |
10.0 |
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氯化钠 |
5.0 |
|
麦芽糖 |
20.0 |
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乳糖 |
1.0 |
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叠氮钠 |
0.4 |
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琼脂 |
13.0 |
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溴甲酚紫 |
0.015 |
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TTC |
0.1 |
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pH 7.2±0.2（25℃） |
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三、试验方法
1、称取本品69.5g，加热溶解于1000 mL蒸馏水中，煮沸搅拌至完全溶解，冷至50℃左右，倾入无菌平皿，备用。
2、制备菌种悬液，接种到KF链球菌琼脂（含TTC）上。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养48h。
四、质控结果
接种以下质控菌株，放置36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养48h。菌株培养结果见图1。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
|
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
红色菌落 |
图1 KF链球菌琼脂（含TTC）的微生物质控结果
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