一、试验原理
本培养基用于致泻大肠埃希氏菌产毒培养，致泻性大肠埃希氏菌分为：产肠毒素性大肠埃希氏菌（ETEC）、肠道侵袭性大肠埃希氏菌（EIEC）、肠道致病性大肠埃希氏菌（EPEC）、肠集聚性黏附性大肠埃希氏菌（EAEC）和肠出血性大肠埃希氏菌（EHEC）5种。
酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持细菌平衡的渗透压；磷酸氢二钾具有缓冲作用；葡萄糖为可发酵糖类；硫酸镁促进微生物生长发育；氯化铁、氯化钴能促进微生物毒素的产生；林可霉素（洁霉素）用于抑制厌氧菌和革兰阳性球菌生长，对革兰阴性菌以及真菌无活性。
二、培养基配方（g/L）
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酪蛋白胨 |
20.0 |
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酵母浸粉 |
10.0 |
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氯化钠 |
2.5 |
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磷酸氢二钾 |
15.0 |
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葡萄糖 |
5.0 |
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硫酸镁 |
0.025 |
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氯化铁 |
0.0025 |
|
氯化钴 |
0.01 |
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pH 7.5±0.1（25℃） |
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三、试验方法
1、称取本品52.54g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，待冷却至45℃-50℃左右时，加入过滤除菌的林可霉素溶液（90μg/mL），混匀备用。
2、制备菌种悬液，接种至Honda氏产毒肉汤中。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养18h-24h。
四、质控结果
接种以下质控菌株，放置36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养18h-24h。菌株培养结果见图1。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
生长情况 |
其他特征 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
10-100 |
+++ |
浑浊 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
浑浊 |
图1 Honda氏产毒肉汤的微生物质控结果
五、注意事项
1、培养基中含少量硫酸镁、氯化钴、氯化铁，灭菌后可能出现微量沉淀。
2、林可霉素属于林可酰胺类抗生素，121℃高温易产生分解影响其功效，故采用过滤除菌方式在Honda氏产毒肉汤高压灭菌冷却后加入，务必避免一同高压灭菌。
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