Honda氏产毒肉汤的原理和使用方法

张宇名
录入时间:2023-5-18 15:04:23 来源：青岛海博生物

一、试验原理

本培养基用于致泻大肠埃希氏菌产毒培养，致泻性大肠埃希氏菌分为：产肠毒素性大肠埃希氏菌（ETEC）、肠道侵袭性大肠埃希氏菌（EIEC）、肠道致病性大肠埃希氏菌（EPEC）、肠集聚性黏附性大肠埃希氏菌（EAEC）和肠出血性大肠埃希氏菌（EHEC）5种。

酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持细菌平衡的渗透压；磷酸氢二钾具有缓冲作用；葡萄糖为可发酵糖类；硫酸镁促进微生物生长发育；氯化铁、氯化钴能促进微生物毒素的产生；林可霉素（洁霉素）用于抑制厌氧菌和革兰阳性球菌生长，对革兰阴性菌以及真菌无活性。

二、培养基配方（g/L）

三、试验方法

1、称取本品52.54g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，待冷却至45℃-50℃左右时，加入过滤除菌的林可霉素溶液（90μg/mL），混匀备用。

2、制备菌种悬液，接种至Honda氏产毒肉汤中。

3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养18h-24h。

四、质控结果

接种以下质控菌株，放置36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养18h-24h。菌株培养结果见图1。

图1 Honda氏产毒肉汤的微生物质控结果

五、注意事项

1、培养基中含少量硫酸镁、氯化钴、氯化铁，灭菌后可能出现微量沉淀。

2、林可霉素属于林可酰胺类抗生素，121℃高温易产生分解影响其功效，故采用过滤除菌方式在Honda氏产毒肉汤高压灭菌冷却后加入，务必避免一同高压灭菌。

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