非选择性增菌培养基的出厂检验及验收方法

一、非选择性增菌培养基的介绍

  非选择性增菌培养基常用于细菌的复苏、活化、增菌培养等，组成为常见的营养成分（如蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉等）和盐类（磷酸盐、氯化钠等），一般不具有针对性，适用于多种细菌的生长，对营养成分进行补充也可用于一些特定细菌的培养，添加抗生素或其他抑菌成分也可制成选择性增菌培养基，常见的非选择性增菌培养基有营养肉汤（NB）、胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）、脑心浸液肉汤（BHI）、缓冲蛋白胨水（BPW）等。

二、培养基的出厂检验

  待测培养基制备：按照说明书进行配制，分装至试管，每管10mL，灭菌冷却后备用。

  菌悬液制备：将质控菌株接种至非选择性肉汤或平板中进行活化培养，使用生理盐水或磷酸盐缓冲液进行十倍系列稀释至含菌量为10-100CFU/mL。

  接种及培养：吸取1mL制备好的菌悬液加入至待测培养基试管中，接种2支平行，同时使用TSA（或其他适宜培养基）进行倾注，计数接种量，置于标准中规定的条件下进行培养。

  结果判定：接种目标菌的试管浊度值应达到2。

  注：如增菌时间小于8小时，培养结束后吸取10μL菌液需用TSA倾注计数，菌数应大于100CFU。

营养肉汤（NB）

三、培养基的验收方法

  将质控菌株接种至非选择性肉汤培养基中过夜培养，稀释至10^-3，也可采用其他方法制备含菌量10⁵-10⁷CFU/mL的菌悬液，使用1μL接种环挑取1环菌液，接种至待测培养基中，置于标准规定的条件进行培养。

  结果判定：接种目标菌的试管浊度值应达到2.

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