一、用途及试验原理:
该培养基用于厌氧菌的分离培养。
胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;L-胱氨酸盐酸盐可以作为还原剂使用,具有抗氧化的作用,去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势,有利于厌氧菌的增菌培养和菌种保存;氯化血红素、维生素K1和脱纤维羊血可为厌氧菌的生长提供生长因子。
添加剂:每瓶需配套添加6盒HB0310a氯化血红素和6盒HB0310b维生素K1和脱纤维羊血使用。
二、培养基配方(g/L):
胰酪蛋白胨 |
15.0 |
大豆蛋白胨 |
5.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
氯化钠 |
5.0 |
L-胱氨酸盐酸盐 |
0.4 |
琼脂 |
15.0 |
pH值7.5±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品45.4g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷至45℃-50℃时,每200mL培养基加入脱纤维羊血10mL、1支HB0310a氯化血红素(0.001g)和1支HB0310b维生素K1(0.002g),混匀,倾入无菌平皿。
2. 将质控菌株划线接种于待测培养基上。
3. 放置于36℃±1℃厌氧培养48h-72h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃厌氧培养48h-72h,试验结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
产气荚膜梭菌 |
ATCC 13124 |
/ |
+++ |
/ |
生孢梭菌 |
ATCC 19404 |
/ |
+++ |
/ |
婴儿双歧杆菌 |
ATCC 15697 |
/ |
+++ |
/ |
图1 CDC厌氧菌琼脂微生物质控结果
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