一、用途及试验原理
本培养基用于假单胞菌选择性分离培养。
明胶蛋白胨、酸水解酪蛋白提供氮源、维生素和生长因子；硫酸钾和氯化镁可促进铜绿色素的产生；琼脂为凝固剂；甘油可增强假单胞菌产生色素与荧光；CFC选择性培养基添加剂可抑制除假单胞菌以外的杂菌生长。
二、培养基配方（g/L）
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明胶蛋白胨 |
16.0 |
|
酸水解酪蛋白 |
10.0 |
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硫酸钾 |
10.0 |
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氯化镁 |
1.4 |
|
琼脂 |
12.0 |
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pH 7.1±0.2（25℃） |
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三、试验方法
1、称取本品49.4g，另取10g甘油加热溶解于1000mL蒸馏水中，分装每瓶200mL，121℃高压灭菌15分钟，冷却至50℃左右时，每瓶加入一支假单胞菌CFC选择性培养基添加剂（HB8689ad），混匀，备用。
2、制备菌种悬液，涂布接种至假单胞CFC选择性培养基中。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养18h-24h。
四、质控结果
接种以下质控菌株，放置36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养18h-24h。菌株培养结果见图1。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
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铜绿假单胞菌 |
ATCC 9027 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
有绿色色素，产荧光 |
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铜绿假单胞菌 |
ATCC 27853 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
有绿色色素，产荧光 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
图1假单胞CFC选择性培养基的微生物质控结果
五、注意事项
1、培养基中含少量氯化镁，灭菌后可能出现微量沉淀。
2、本培养基需额外添加甘油，由于甘油粘稠不易吸取，很容易造成添加量偏差。可采取裁剪移液器吸头尖使其口径扩大的方式进行吸取，操作注意平稳缓慢。
3、假单胞菌CFC选择性培养基添加剂为冻干固体，加1 mL无菌蒸馏水复溶后使用。
4、与CN琼脂的区别：
① 从成份上：主要成分两者相同，不同的是他们选择的抑菌剂不同；
② 假单胞CFC选择性培养基是用来推荐分离假单胞菌属。CN琼脂是推荐分离铜绿假单胞菌（又称绿脓假单胞菌或绿脓杆菌）。
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