一、用途：
用于饲料中沙门氏菌分离培养。
二、实验原理：
蛋白胨、酵母浸粉，牛肉浸粉提供氮源、维生素和矿物质；磷酸氢二钠和磷酸二氢钠维持均衡的渗透压；乳糖和蔗糖提供碳源；煌绿抑制革兰氏阳性菌和除了沙门氏菌外的大部分革兰氏阴性菌；酚红是pH指示剂；琼脂是凝固剂。
三、培养基成分（g/L）：
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蛋白胨 |
10.0 |
|
酵母浸粉 |
3.0 |
|
牛肉浸粉 |
5.0 |
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磷酸氢二钠 |
1.0 |
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磷酸二氢钠 |
0.60 |
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乳糖 |
10.0 |
|
蔗糖 |
10.0 |
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酚红 |
0.09 |
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煌绿 |
0.0125 |
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琼脂 |
15.0 |
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pH 7.0±0.1 25℃ |
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四、试验方法：
1、称取本品54.7g，加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中，冷却至50-55℃左右时，倾入无菌平皿，备用。无需高压灭菌，当天制备当天使用。
2、制备质控菌液。
3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml，均匀涂布于待测平板以及参比平板上，每一稀释度接种两个平板。
4、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。
5、36±1℃倒置培养基培养18-24小时，记录实验结果。
五、酚红煌绿微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24小时。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计 数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
|
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福氏志贺氏菌 |
ATCC13124 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
|
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伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
粉白色菌落，菌落 周围稍变红 |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
CMCC(B)50115 |
20-200 |
PR≥0.7 |
粉白色菌落，菌落 周围稍变红 |
图1-2 酚红煌绿琼脂微生物质控结果
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