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一、培养基用途：
用于副溶血性弧菌生化鉴定。
二、原理：
某些细菌可产生精氨酸脱羧酶，使精氨酸脱去羧基，生成精胺，从而使培养基变碱性并通过指示剂变色来观察。脱羧酶是适应酶或称诱导酶，对底物有特异性，在无相对氨基酸的培养基中不产生此酶，并且需要酸性环境和适宜温度。故在培养基中加入葡萄糖，使细菌发酵葡萄糖产酸，以利于脱羧酶的产生。氨基酸的分解是在厌氧条件下进行，故在培养基表面加液体石蜡。由于细菌发酵葡萄糖产酸，在培养初期培养基和对照培养基呈黄色，继续培养时，若氨基酸经脱羧或水解产生胺类则培养基变碱，呈紫色或紫红色，即为阳性反应；如至培养末期培养基如同对照管一样均呈黄色，则判为阴性反应。
三、培养基成分
|
成分 |
含量（g/L） |
|
酵母浸粉 |
3.0 |
|
L-精氨酸 |
5.0 |
|
葡萄糖 |
1.0 |
|
溴甲酚紫 |
0.016 |
|
氯化钠 |
30.0 |
|
pH 6.7±0.1 25℃ |
|
四、操作方法
1、用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈，掰开待用；
2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法，制备成5 McFarland浊度（约109CFU/ml）的菌悬液；
3、吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至3%NaCl精氨酸双水解酶生化管生化管，36±1℃培养24±2h后，观察试验结果。
五、实验结果
接种以下质控菌株，36±1℃培养24±2h：
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质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
|
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
+++ |
阴性，黄色 |
|
普通变形杆菌 |
ATCC13315 |
+++ |
阴性，黄色 |
|
溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
+++ |
阴性，黄色 |
|
阪崎肠杆菌 |
ATCC29004 |
+++ |
阳性，紫色 |
|
创伤弧菌 |
ATCC27562 |
+++ |
阴性，黄色 |
图1 3%NaCl精氨酸双水解酶生化管质控结果
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
