转化

对于原核细胞，常采用转化将目的基因导入受体细胞。原核细胞的转化过程就是一个携带基因的外源DNA分子通过与膜结合进入受体细胞、并在胞内复制和表达的过程。转化过程包括制备感受态细胞和转化处理。

感受态细胞（competentcells）是指处于能摄取外界DNA分子的生理状态的细胞。在制备感受态细胞时，应注意：

① 在最适培养条件下培养受体细胞至对数生长期，培养时一般控制受体细胞密度OD₆₀₀在0.4左右；

② 制备的整个过程控制在0～4℃；

③ 为提高转化率，常选用CaCl₂溶液。

CaCl₂促进转化的机制尚不清楚，可能是CaCl₂在细胞壁上打了一些孔，DNA分子就能够从这些孔中进人细胞，这些孔随后又被宿主细胞修复。

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