悬浮和运输培养基的出厂检验及验收方法

一、悬浮和运输培养基的介绍

  在进行微生物检验工作时，经常会用到一些样品制备或者样品运输的培养基，其目的是保证微生物的活性，要求微生物存活并且不能过分增殖，处于相对稳定的一个状态。用于样品制备和菌液稀释的磷酸盐缓冲液、0.1%蛋白胨水等都属于悬浮培养基，而用于采样运输的Cary-Blair氏运送培养基、Amies运送培养基等都属于运输培养基。

二、培养基的出厂检验

  待测培养基制备：按照说明书进行配制，分装至试管，每管10mL（有特殊要求也可选用5mL）。

  1.接种及计数

  菌悬液制备：将质控菌株接种至非选择性肉汤或平板中进行活化培养，使用生理盐水或磷酸盐缓冲液进行十倍系列稀释至适宜梯度。

  在装有待测培养基的试管中接种100 CFU～1000 CFU的目标菌，同时接种两个平行管，混匀后，立即吸取1mL待测培养基混合液，使用非选择性固体培养基倾注，每管接种1个平板；将剩余已接种菌液的待测培养基置20℃～25℃放置45min后；再吸取1 mL倾注平板，使用非选择性固体培养基倾注，将平板置相应温度下进行培养。

  培养结束后，计数静置前后平板上的菌落数。

  2.结果判定

  静置前后菌落数变化应在±50%。

  静置变化率=（静置后平板菌落数-静置前平板菌落数）/静置前平板菌落数×100%

三、培养基的验收方法

  菌悬液制备：将目标菌接种至非选择性肉汤中过夜培养。

  接种：用1μL接种环取一环工作菌悬液直接接种到装有待测培养基的试管中,混匀后，立即用10μL接种环取一环工作菌培养物划平行线接种平板，按标准方法中规定的培养时间和温度培养；剩余已接种菌液的待测培养基置20℃～25℃放置45min后，再用10μL接种环取一环工作菌培养物划平行线接种平板，按标准方法中规定的培养时间和温度培养。

  结果判定：静置前后接种平板上的目标菌应生长良好。

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