一、用途及试验原理
用途:本培养基一般用于亚硫酸还原梭状芽孢杆菌的计数。
原理:胰蛋白胨和酵母浸粉用于提供氮源,柠檬酸铁铵和亚硫酸钠提供还原性并产生硫化氢使菌落呈黑色,多粘菌素B和硫酸新霉素可以抑制非还原性梭状芽孢杆菌的生长,琼脂为凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
胰蛋白胨 |
15.0 |
酵母浸粉 |
10.0 |
亚硫酸钠 |
1.0 |
柠檬酸铁铵 |
0.5 |
琼脂 |
16.0 |
pH值7.6±0.1(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品42.5g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装,每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷至45℃-50℃时,无菌加入一支多粘菌素B(4μg,HB0304-2a)和一支硫酸新霉素(100μg,HB0304-2b),混匀,倾入无菌平皿,备用。
2、制备质控菌液,接种到该培养基上。
3、放置于37℃±1℃恒温培养箱中,厌氧培养24h-48h。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置37℃±1℃恒温培养箱中,厌氧培养24h-48h。结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
产气荚膜梭菌 |
ATCC 13124 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落 |
产气荚膜梭菌B型 |
/ |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
图1 亚硫酸铁多粘菌素B琼脂的微生物质控结果
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