一、用途及试验原理
用途：本培养基一般用于亚硫酸还原梭状芽孢杆菌的计数。
原理：胰蛋白胨和酵母浸粉用于提供氮源，柠檬酸铁铵和亚硫酸钠提供还原性并产生硫化氢使菌落呈黑色，多粘菌素B和硫酸新霉素可以抑制非还原性梭状芽孢杆菌的生长，琼脂为凝固剂。
二、培养基配方（g/L）
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胰蛋白胨 |
15.0 |
|
酵母浸粉 |
10.0 |
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亚硫酸钠 |
1.0 |
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柠檬酸铁铵 |
0.5 |
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琼脂 |
16.0 |
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pH值7.6±0.1（25℃） |
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三、试验方法
1、称取本品42.5g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，分装，每瓶200mL，121℃高压灭菌15分钟，冷至45℃-50℃时，无菌加入一支多粘菌素B（4μg，HB0304-2a）和一支硫酸新霉素（100μg，HB0304-2b），混匀，倾入无菌平皿，备用。
2、制备质控菌液，接种到该培养基上。
3、放置于37℃±1℃恒温培养箱中，厌氧培养24h-48h。
四、质控结果
接种以下质控菌株，放置37℃±1℃恒温培养箱中，厌氧培养24h-48h。结果如图1所示。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
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产气荚膜梭菌 |
ATCC 13124 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落 |
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产气荚膜梭菌B型 |
/ |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
图1 亚硫酸铁多粘菌素B琼脂的微生物质控结果
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