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浅谈微生物检验中的假阳性与假阴性(一)

王天宇
录入时间:2023-11-15 16:20:36 来源:青岛海博生物

  没有一种培养基能够一步便100%确定样品中是否含有某种细菌,检验样品中是否含有某种细菌,往往需要多步生化反应判断或辅以血清学或PCR检测。如何在检验中抑制干扰菌同时找出我们需要的目标菌,尽量避免出现假阴性(实际样本含目标菌,但未检出,此时为假阴性)或假阳性(实际样本不含目标菌,但检出,此时为假阳性)一直是微生物检验工作中的重点和难点。本系列旨在以GB.4789系列为基础,浅谈可能出现的假阴性与假阳性情况。

  检验沙门氏菌属时,由于其种类繁多,生化反应各异,且在生活中十分常见、送检样本多,非常容易在检验过程中出现假阳性和假阴性的情况。
  在《GB 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》(下文称《标准》)中,第一布首先需要进行预增菌,这是为了避免样品中的沙门氏菌受损活力不佳导致选择性增菌后无沙门氏菌检出,导致假阴性。第二步选择性增菌时,则同时选取了亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)和四硫磺酸盐煌绿增菌液TTB)两种选择性增菌培养基来对沙门氏菌进行增菌,这是因为SC与TTB各自的抑菌性不同,对不同种类沙门氏菌的增菌效果也不同。SC的抑菌性相对较弱,TTB抑菌性相对较强。避免选取单一增菌液造成后续结果出现假阴性。

  而在接下来的菌种分离挑选可疑菌落的过程中,则必选亚硫酸铋(BS)琼脂,沙门氏菌显色、HE琼脂、XLD琼脂三选一,这也是因为不同培养基,对于不同沙门氏菌的选择性并不完全相同,这样选择可以尽可能提高检出率避免假阴性。

  在此步骤经常有人会产生疑问,为什么HE、XLD、BS上几乎所有形态的菌落都被纳入了可疑菌落,为什么显色平皿上已经显色却不能直接判定有沙门氏菌?其实,沙门氏菌种类繁多,常见的沙门氏菌多数为硫化氢反应阳性,在HE\XLD\BS上呈现出黑色中心菌落,但也应注意到,部分沙门氏菌,如甲型副伤寒沙门氏菌,硫化氢反应阴性或硫化氢产生较少,此时他们会呈现出无色菌落。部分沙门氏菌,如亚利桑那沙门氏菌,也可发酵乳糖产酸,呈现周围黄色的菌落而部分变形杆菌属细菌,也会产生硫化氢,导致菌落产生黑色中心。而《标准》中对于可疑目标菌落的样式,也有详细的说明。而沙门显色培养基,虽然对沙门氏菌具有高度的特异性,但是一些非沙门氏菌属的细菌,也会呈现紫色(此处紫色为沙门氏菌显色培养基第二代上沙门氏菌呈现的典型颜色),造成假阳性,因此不能仅凭沙门氏菌显色平皿的颜色反应就直接判定是否含有沙门氏菌,必须进行下一步的生化鉴定,必要时进行血清学分型。

  由此我们可以发现,在《标准》中,都是为了尽可能的检出沙门氏菌,避免假阴性,而选用了多种培养基同时进行实验,在检验中是不可以只做某一种或只做某一步的,否则会极大增加假阴性出现的概率。


相关产品:

亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)-点击查看产品详情

四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)-点击查看产品详情


相关标准:

GB 4789.4-2016 沙门氏菌检验 -点击下载标准


注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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