一、菌株制备
活化:将所需的质控菌株接种至非选择性平板上培养至菌落适宜大小。
注:对于一般生长速度较快的菌株,过夜培养即可;生长速度慢的菌株可适当延长培养时间。
菌悬液制备(接种液体培养基使用):挑取平板上的纯菌落至生理盐水中,制成约5麦氏浊度的菌悬液(约109CFU/mL)。
注:此处不建议使用肉汤培养物制备菌悬液,肉汤培养基中含有的成分可能会对部分试验结果造成影响,因此宜采用平板上的菌落制备菌悬液。
二、接种方法及注意事项说明
1.液体类鉴定培养基:吸取50-100μL制备好的菌悬液加入制备好的培养基中,置于标准规定的条件下进行培养。也可用接种针或接种环挑取待测菌落,直接接种至培养基中。
注:一般情况下,接种的菌悬液浓度越大,可以更早的观察到试验结果;但对于需观察是否浑浊的生化试验,接种的菌悬液浓度和体积不宜过大。
2.半固体/固体摆直立类培养基:用接种针挑取平板上的菌落,垂直穿刺接种。
3.平板点种:用接种环或接种针挑取平板上的菌落,点种于平板上,接种不宜太过密集。
4.平板划线:用接种环挑取菌落或菌悬液,在平板上分区划线。
5.长斜面:用接种环或接种针挑取菌落在斜面上“之”字形划线。
6.高层斜面:用接种针挑取菌落,在斜面上“之”字形划线,并穿刺底层。
三、结果观察
接种对应的阴阳性菌株,应出现对应的阳性或阴性反应,或特定的现象,即为培养基合格。
注:需添加试剂观察现象的,应严格按照说明书操作。
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