非动物源性蛋白胨的相关介绍
录入时间:2024-1-23 13:58:34
来源:食品微生物实验室质量管理手册(第二版)
1.概述
从建立细菌人工培养方法以来,细菌的生长离不开动物源性成分的支持,尤其是经酶水解消化后形成的䏡、胨、肽和氨基酸组成的蛋白胨,是目前支持微生物生长不可替代的主要营养成分,但在相继出现如疯牛病(BSE),传染性海绵状脑病(TSE)或口蹄疫等动物疾病之后,一方面出于安全考虑,100%的植物源性蛋白胨,避免了BSE和TSE带来的风险;另一方面,植物中的某些特殊成分对于某些微生物来说,使用植物源性蛋白胨会获得更好的生长并提高相应产品产量。由于大豆蛋白质含量很高,而且其氨基酸组成较为齐全,其优质蛋白经木瓜酶水解后获得的大豆蛋白胨还富含碳水化合物及钙元素,大豆蛋白胨的优良特性不仅弥补了动物组织来源蛋白胨的某些成分的不足,还避免了疯牛病等有害生物因子可能带来的风险,因此,大豆胨成为第一个成功用于细菌培养的植物蛋白胨,在培养基的应用中非常广泛,是植物源性蛋白胨最具代表性的产品,但也存在一些缺陷,如含硫氨基酸的含量很低除大豆蛋白胨外,许多新植物性产品在市场上被测试,如小麦、豌豆、马铃薯、花生等蔬菜作为生产蛋白胨的原料,这些植物性材料丰富了植物蛋白胨的种类。
2.产品分类
(1)大豆蛋白胨
大豆蛋白胨是由大豆蛋白质经酶水解消化后形成的䏡、胨、肽和氨基酸组成的一种水溶性混合物,是目前支持微生物生长不可替代的主要营养成分,广泛应用于生物技术、制药、动物和人类疫苗生产及利用微生物净化有毒有害物质和受污染水域处理等领域,大量应用于微生物发酵生产、工业研究﹑质量管理与控制和环境监测等行业。
(2)蔬菜蛋白胨
1)植物提取物(Vegetable Extract)
植物提取物是一种可替代肉类提取物粉末或肝脏提取物粉末的100%植物源性蛋白胨。它是从蔬菜中提取的蛋白质,含有种类繁多的肽,可以使营养要求高的微生物达到最快生长。美国Sigma公司生产有3种植物提取物:包括植物提取物,植物提取物1号和植物提取物2号。其中,植物提取物多用于培养大肠杆菌﹑变形杆菌﹑假单胞菌﹑葡萄球菌和链球菌;植物提取物1号可以促进假单胞菌、沙门氏菌、志贺氏菌﹑葡萄球菌﹑链球菌和耶尔森氏菌的生长。植物提取物⒉号则是特别制备的蔬菜蛋白质的脱水提取物﹐将其加入疏基乙酸培养基,可用于培养布鲁氏菌,梭状芽孢杆菌等营养要求高的厌氧菌。加入到血琼脂培养基中还可用于培养多种病原微生物﹐如奈瑟氏菌﹑葡萄球菌和链球菌等。
2)植物浸粉(Vegetable Infusion Powder)
植物浸粉是一种可替代心脏浸粉或心脑浸粉的植物源性蛋白胨。它是在一定条件下从植物蛋白获得的脱水浸剂。可用于培养不易生长的微生物,主要有两种植物浸粉,一种用于培养如布鲁氏菌、支原菌、肺炎双球菌﹑淋病球菌﹑放线菌和真菌等,还可用于抗生素敏感试验。另一种被称作植物特殊浸粉,适用于培养大肠杆菌、变形杆菌、奈瑟氏菌、念珠菌和嗜血杆菌等,多用于疫苗的发酵生产以及用于制备血琼脂平板。
3)植物水解产物(Vegetable Hydrolysate)
植物水解产物蛋白胨是植物蛋白的水解产物。美国Sigma公司有4种植物水解产物和1种植物酸水解蛋白胨。其中,1号植物水解产物是植物胰蛋白示(Tryptose),它可以替换传统的动物源性胰蛋白示,用于快速大规模的制造疫苗和毒素;2号植物水解产物是肝脏水解产物替代品,它含有种类繁多的肽,可以促使梭状芽孢杆菌﹑拟杆菌和布鲁氏菌等的生长;3号植物水解产物为植物䏡蛋白胨(Proteose Peptone),它可以完全替代传统动物源性䏡蛋白胨,可用于批量生产抗生素、酶、兽药制剂﹑细菌毒素等。植物源性胰蛋白胨(Tryptone)也是一种植物水解产物,可以完全替代传统的胰蛋白胨;植物蛋白胨酸水解产物是酪蛋白酸水解产物替代品,是经过纯化的水解产物,可提供给培养基必需的氮源﹐并可用于需要氨基酸混合物的培养基。它可用于制备抗生素敏感试验培养基(包括Mueller Hinton琼脂),可用于需要定量加入色氨酸的培养基,可作为高浓度游离氨基酸源用于疫苗制备培养基。
4)其他蛋白胨
1号植物蛋白胨是传统普通蛋白胨的替代品﹐用于细菌和真菌生长的高营养通用型蛋白胨。
2号植物蛋白胨是明胶蛋白胨替代品,是一种低营养价值的蛋白胨,是在一定条件下通过植物蛋白的酶消化制备而成。多用于发酵研究;紫琼脂基础、无糖琼脂、MacConkey琼脂﹑紫红胆盐琼脂等;植物新胨蛋白胨是由植物蛋白在特定条件下制成。特别适合用于制备培养营养要求高的微生物的培养基,以及用于替代特殊蛋白胨,用于难培养细菌的培养和发酵培养基。
马铃薯蛋白胨是通过控制酶水解马铃薯蛋白制成,富含有机氦和生长因子,通常用于工业发酵培养基。
蚕豆蛋白胨通过蚕豆蛋白浓缩物的酶水解而获得,该蛋白胨为众多微生物提供良好的生长,并在某些情况下可作为肉蛋白胨的替代品,通常用于工业发酵和诊断。
小麦蛋白胨是通过酶水解小麦蛋白获得,多用于培养肠杆菌、李斯特菌和乳杆菌。
3.质量控制指标
植物源性蛋白胨的品种有很多,不同的品种有其不同的规格标准,目前国际上没有一个统一的质量标准。故以下仅列出国内外主要生产企业的产品规格及控制指标,以供读者参考,质控指标见表4-3-1和表4-3-2;大豆蛋白胨的检验报告分析见表4-3-3。
表4-3-1 感官指标
参数
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指标
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色泽
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浅黄色或黄色
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性状
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颗粒或粉末
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气味
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特殊气味
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杂质
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无肉眼可见杂质
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表4-3-2 理化指标
参数
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指标
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pH值
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5.5~7.5
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水分
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≤5.0%*
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灰分
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≤15.0%*
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澄清度
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2%完全溶解
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总氮
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≥9.0%*
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氨基酸态氮
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≥3.0%*
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*表示为质量分数
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表4-3-3 产品检验报告
参数
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指标
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色泽
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淡黄色
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性状
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颗粒状粉末
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杂质
|
无肉眼可见杂质
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总氮
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9.11%*
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氨基酸态氮
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4.07%*
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炽灼残渣
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14.49%*
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干燥失重
|
3.72%*
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*表示为质量分数
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4.质量控制方法
等同动物源性蛋白胨的判断标准。
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