一、产品用途及原理:
用途:该培养基用于单增李斯特氏菌选择性增菌培养。
原理:胰蛋白胨、大豆胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钾是培养基pH缓冲剂;葡萄糖可为多种细菌提供能源;萘啶酮酸和吖啶黄素为抑菌剂,萘啶酮酸可抑制多数革兰氏阴性菌的生长,吖啶黄素对多种革兰氏阳性菌有较强的抑制作用,对李斯特氏菌抑制作用较弱。
二、培养基配方(g/L):
胰蛋白胨 |
17.0 |
大豆胨 |
3.0 |
酵母浸粉 |
6.0 |
氯化钠 |
5.0 |
磷酸氢二钾 |
2.5 |
葡萄糖 |
2.5 |
pH值7.3±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品36.0g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,分装,每瓶225mL,121℃高压灭菌15分钟,使用前加入过滤除菌的吖啶黄素(HB4150b)一支和萘啶酮酸(HB4150a)一支,充分摇匀备用。
2. 将质控菌株进行10倍梯度稀释,选择适宜的稀释度,接种于培养基上。
3. 放置于恒温培养箱30℃±1℃需氧培养24h-48h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于30℃±1℃需氧培养24h-48h,试验结果如图1。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
单增李斯特氏菌 |
ATCC 19114 |
10-100 |
+++ |
浑浊 |
英诺克李斯特氏菌 |
ATCC 33090 |
10-100 |
+++ |
浑浊 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
- |
抑制 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
-/+ |
部分抑制 |
质控菌株接种量计数结果:
图1 EB增菌液培养基微生物质控结果
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