一、稀释液的原理及成分

  稀释液主要用于样品的制备，使样品均匀分散开，样品中的菌落能够均匀悬浮于稀释液中，并维持菌落数在短时间内相对稳定，以便于后续的监测。对于含有抑菌成分的样品，可在稀释液中加入对应的中和剂成分，消除抑菌成分的影响。对于厌氧菌的稀释时，可在稀释液中加入少量的还原性成分（如半胱氨酸），减少氧气的毒害作用。对于油性的样品，可在稀释液中加入表面活性剂（如吐温80）帮助溶解分散均匀。

  稀释液通常由氯化钠、磷酸盐、蛋白胨、还原剂、中和剂等成分中的一种或几种组成，氯化钠主要维持渗透压，磷酸盐维持pH的相对稳定，少量的蛋白胨有助于维持细菌的活力，还原剂可帮助形成厌氧化解，中和剂可消除抑菌成分的抑菌效果。

二、常用的稀释液选择

  1.0.85%-0.9%氯化钠溶液（生理盐水）

配制简单，实验室最常用，对于一般细菌或真菌菌悬液的制备、偏中性样品液的制备，均可使用，不具有增殖效果，制备好的菌悬液可在验证的效期内使用。

  2.磷酸盐缓冲液

效果与生理盐水相似，具有一定的缓冲效果，通常使用pH7.2的磷酸盐缓冲液，对于pH偏酸或偏碱的样品，也可选用其他pH的磷酸盐缓冲液制备，不具有增殖效果，制备好的菌悬液可在验证的效期内使用。

  3.0.1%蛋白胨水

成分为1g/L蛋白胨，相比较于生理盐水，0.1%蛋白胨水更有利于一些脆弱细菌的存活（如厌氧菌等），稀释产气荚膜梭菌、双歧杆菌等细菌时，效果要优于生理盐水。因蛋白胨有增殖效果（时间久了细菌会繁殖变多），因此用0.1%蛋白胨水制备的菌悬液需及时使用，一般细菌建议在45min内使用，厌氧菌应在15min内使用。

  4.pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液

相比较于0.1%蛋白胨水，增加了少量的磷酸盐起到缓冲作用，效果与0.1%蛋白胨水相似，更多用于药品悬液制备，也可制作细菌悬液，具有增殖效果，制备的菌悬液建议在45min内使用（厌氧菌应在15min内使用）。

  5.半胱氨酸稀释液

主要成分有氯化钠、氯化钾、氯化钙、碳酸钠、半胱氨酸组成，无增殖效果，通常用于厌氧菌的稀释和样品制备。

  6.蛋白胨-盐溶液

由氯化钠和少量蛋白胨组成，具有增殖效果，与0.1%蛋白胨水效果相似，一般用于芽孢数测定样品制备，也可用于一般样品或菌悬液的制备。

  7.明胶磷酸盐缓冲液

由明胶和磷酸盐组成，一般用于肉毒梭菌检验样品的制备。

  8.卵磷脂吐温稀释液

由少量蛋白胨、卵磷脂和吐温80组成，卵磷脂和吐温80具有中和防腐剂的作用，通常用于含防腐剂样品悬液的制备。

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