一、肺炎支原体发病简介

  肺炎支原体是人类支原体肺炎的病原体，一旦感染难以完全根治。肺炎支原体感染呼吸道后能借助滑行运动定位于纤毛之间，通过粘附细胞器上的P1黏附素等，黏附于上皮细胞表面，抵抗黏膜纤毛的清除和吞噬细胞的吞噬，并伸出微管插入胞内吸取营养，继而合成过氧化氢等，从而导致细胞的溶解和上皮细胞的氧化应激反应，进而引起炎症。由于肺炎支原体和人体部分组织之间有共同的抗原，在发生肺炎感染之后还可能引起多系统多器官的免疫损害。若是幼儿感染了肺炎支原体，由于自身免疫功能和其他系统器官等的发育不完善，会导致损伤更为严重。不过临床有部分患者症状较轻或无症状。

  为肺炎支原体样本的采集、转运保存，我公司专门推出支原体采样管（货号：HBPT077）。

二、支原体采样管的检验原理

  酵母浸粉、肉浸粉和血清提供的营养可保证支原体的存活与生长，肺炎支原体生长时可分解葡萄糖产酸导致pH下降，采样管颜色由红变黄，青霉素可抑制多数细菌的生长。

三、支原体采样管的使用方法

  1. 采样：取一支支原体采样管，采样前打开包装，该产品配备有采样拭子、采样管、安全袋，在规定的采样部位进行样本采集，可采用最常见的咽拭子采样法，咽拭子的采样手势如图1所示，采样时，先请被检测者张开口，用该消毒过的采样拭子在咽部拭取分泌物，然后放入采样管中，折断拭子尾部手柄，并将尾部手柄放入安全袋中灭菌处理，拧紧采样管后，标记采样管采样人、采样具体时间、采样地点等信息，随后将支原体采样管放入新开启的安全袋中，用于送样检测。

图1 咽拭子的采样手势

  2. 培养：运送采样管至实验室，若当天检测可置于4℃冷藏后培养或提取核酸，将该采样管置于36℃培养箱中培养1-3天，若该阳性管由红变黄或为橙黄，且无沉淀或菌膜，报告阳性结果。若采样管出现沉淀或者菌膜，该阳性变化也可能是细菌污染导致的假阳性。当天不检验应-20℃以下低温冻存，避免操作前再次冻融。

四、支原体采样管性能

  1. 外观：本品为红色透明液体状。

  2. 灵敏度：接种浓度为10⁸CCU/mL的肺炎支原体（ATCC 15531），放置36℃±1℃需氧培养1 d时已有阳性变化，培养至41 h时，结果应为明显的阳性，如图2所示。

图2 接种肺炎支原体培养后的阳性变化

  3. 特异性：分别接种1000 CFU的大肠埃希氏菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、沙门氏菌ATCC 14028至支原体采样管中，放置36℃±1℃需氧培养1-2天后，结果为阴性，如图3所示。

图3 支原体采样管对常见菌株的抑制作用

五、补充内容-支原体平板培养

  虽然支原体采样管中加入了青霉素可抑制大多数杂菌，但仍然有部分杂菌是无法被抑制的，这就可能造成个别假阳性结果，假阳性的表现一般为培养液由红变黄，同时还出现漂浮着的菌膜、培养液底部出现沉淀、培养液变浑浊等现象，如图4所示。

图4 培养液假阳性示例图

（左3支为污染示例，右1支为空白对照）

  假阳性现象会干扰结果的判断，有条件允许的情况下除提取核酸外，还可进行固体平板培养，我公司有相应的支原体琼脂培养基平板（货号：HB7025-3），肺炎支原体在固体平板上的生长状态如图5所示。

图5 肺炎支原体在固体平板上的生长状态

  肺炎支原体菌落染色镜检形态如图6所示。

图6 肺炎支原体菌落染色镜检

六、支原体采样管使用的注意事项

  1. 本品不用于临床诊断；

  2. 使用后的培养基应进行消毒处理；

  3. 本产品只适用于经过培训的实验人员使用；

  4. 本产品使用时，应戴手套和口罩做好防护措施；

  5. 产品出现污染，变色，漏液或过期时应禁止使用；

  6. 样本标记信息应清晰，样品应及时送检以提高准确性。

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