一、试验原理：
弧菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基，用于食品、海产品、病人粪便样品和水产品中副溶血性弧菌的快速检测。副溶血性弧菌显蓝绿色且菌落比较大，霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色，溶藻弧菌显淡黄色或米黄色，其它细菌绝大部分被抑制。本培养基的特异性高，可以克服TCBS培养基引起的假阴性结果，是一种很理想的快速检测培养基。
弧菌自身代谢产生的酶与相应显色底物反应使菌落显色，以区分目标菌与非目标菌。显色底物是由产色因子和微生物部分可代谢物质组成，在特异性酶作用下，游离出产色因子使弧菌菌落显示相应的颜色。
二、培养基配方（g/L）：
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特殊营养物质 |
75.0 |
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混合显色剂 |
4.45 |
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琼脂 |
15.0 |
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pH值8.6±0.1（25℃） |
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三、试验方法：
1. 称取本品18.9g加入200mL蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸3-5次。冷却至45℃-50℃时，倾入无菌平皿。注意：制备好的培养基表面不能太干燥。
2. 10倍梯度稀释法制备目标菌菌悬液，吸取合适梯度的菌悬液涂布接种于待测培养基和参比培养基上。
3. 非目标菌（特异性）定性测试，接种环取一环质控菌株培养液划线接种至待测平板上。
4. 放置于恒温培养箱36℃±1℃需氧培养18h-24h，观察试验结果。
四、试验结果判断：
接种以下质控菌株，放置于36℃±1℃需氧培养18h-24h，试验结果如图1所示。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
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副溶血性弧菌 |
ATCC 17802 |
20-200 |
3%NaCl TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
蓝绿色，菌落比较大 |
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溶藻弧菌 |
ATCC 17749 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
淡黄色或米黄色 |
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霍乱弧菌 |
非O1群 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
紫红色 |
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创伤弧菌 |
ATCC 27562 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
紫红色 |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
图1 弧菌显色培养基（第二代）微生物质控结果
注：A：副溶血性弧菌；B：溶藻弧菌；C：霍乱弧菌；D：创伤弧菌；E：金黄色葡萄球菌；F：大肠埃希氏菌
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