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弧菌显色培养基(第二代)原理和使用方法

张辉
录入时间:2024-3-12 10:50:43 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  弧菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、海产品、病人粪便样品和水产品中副溶血性弧菌的快速检测。副溶血性弧菌显蓝绿色且菌落比较大,霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色,溶藻弧菌显淡黄色或米黄色,其它细菌绝大部分被抑制。本培养基的特异性高,可以克服TCBS培养基引起的假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。

  弧菌自身代谢产生的酶与相应显色底物反应使菌落显色,以区分目标菌与非目标菌。显色底物是由产色因子和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶作用下,游离出产色因子使弧菌菌落显示相应的颜色。


二、培养基配方(g/L):

特殊营养物质

75.0

混合显色剂

4.45

琼脂

15.0

pH值8.6±0.1(25℃)


三、试验方法:

  1. 称取本品18.9g加入200mL蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸3-5次。冷却至45℃-50℃时,倾入无菌平皿。注意:制备好的培养基表面不能太干燥。

  2. 10倍梯度稀释法制备目标菌菌悬液,吸取合适梯度的菌悬液涂布接种于待测培养基和参比培养基上。

  3. 非目标菌(特异性)定性测试,接种环取一环质控菌株培养液划线接种至待测平板上。

  4. 放置于恒温培养箱36℃±1℃需氧培养18h-24h,观察试验结果。


四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养18h-24h,试验结果如图1所示。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控结果

其他特征

副溶血性弧菌

ATCC 17802

20-200

3%NaCl TSA

定量

PR≥0.5

蓝绿色,菌落比较大

溶藻弧菌

ATCC 17749

/

/

定性

/

淡黄色或米黄色

霍乱弧菌

非O1群

/

/

定性

/

紫红色

创伤弧菌

ATCC 27562

/

/

定性

/

紫红色

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

/

/

半定量

G≤1

/

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

/

/

半定量

G≤1

/

图1 弧菌显色培养基(第二代)微生物质控结果

注:A:副溶血性弧菌;B:溶藻弧菌;C:霍乱弧菌;D:创伤弧菌;E:金黄色葡萄球菌;F:大肠埃希氏菌


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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