一、产品用途及原理
用途:本培养基用于产气荚膜梭菌确认试验。
添加剂:每瓶需配套添加206盒HB8508-1a焦亚硫酸钠溶液和206盒HB8508-1b柠檬酸铁铵溶液使用,每8 mL乳糖亚硫酸盐培养基(LS)需要1支焦亚硫酸钠和1支柠檬酸铁铵溶液。
原理:胰酪胨、酵母膏为微生物的生长提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖为可发酵的糖类,产气荚膜梭菌可发酵乳糖产酸产气;L-半胱氨酸盐酸盐能有效降低氧化还原电位,防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性;焦亚硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落呈黑色。
二、培养基配方(g/L)
胰酪胨 |
15.0 |
酵母膏 |
2.5 |
氯化钠 |
2.5 |
乳糖 |
10.0 |
L-半胱氨酸盐酸盐 |
0.3 |
pH值7.1±0.2(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品30.3g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装至含有倒置小导管的试管中,每管8mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却,临用前,每管添加1支焦亚硫酸钠溶液(0.5mL)和1支柠檬酸铁铵溶液(0.5mL),当天使用。
2、制备质控菌液接种到培养基中。
3、放置于36℃±1℃厌氧培养18h-24h。
四、结果观察
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃厌氧培养18h-24h。培养结果如图1。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其它特征 |
产气荚膜梭菌 |
ATCC 13124 |
>5000 |
+++ |
变黑 |
图1 乳糖亚硫酸盐培养基(LS)的微生物质控结果
五、注意事项
1、使用时,需保证倒置的小导管中无气泡,防止对产气结果造成干扰。
2、可通过滴加液体石蜡构造试管中的厌氧环境。
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