一、培养基用途：
用于艰难梭菌的选择性分离培养。
二、培养基成分及使用方法：
1.培养基成分
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成分 |
含量（g/L） |
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胰蛋白胨 |
10.0 |
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牛肉浸粉 |
10.0 |
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酵母粉 |
3.0 |
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葡萄糖 |
1.0 |
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可溶性淀粉 |
1.0 |
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氯化钠 |
5.0 |
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碳酸氢钠 |
0.4 |
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L-半胱氨酸盐酸盐 |
0.5 |
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丙酮酸钠 |
1.0 |
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L-精氨酸 |
1.0 |
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焦磷酸盐 |
0.25 |
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果糖 |
6.0 |
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琥珀酸 |
0.5 |
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氯化血红素 |
0.01 |
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中性红 |
0.03 |
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琼脂 |
13.2 |
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pH 7.2±0.2 25℃ |
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2.使用方法
称取本品 53.20g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，每瓶200mL。121℃高压灭菌15min，冷却至45-50℃时，每200mL培养基加入50%卵黄乳液10mL、无菌环丝氨酸0.1g和无菌头孢西丁3.2mg。混匀，倾入无菌平皿，备用。
三、 原理：
蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖可溶性淀粉、L-半胱氨酸盐酸盐、L-精氨酸、焦磷酸盐、氯化血红素、琥珀酸、丙酮酸钠提供碳源、氮源、维生素和生长因子；果糖为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；中性红是酸碱指示剂，酸性条件变黄；琼脂是培养基凝固剂；环丝氨酸和头孢西丁可抑制杂菌和其他梭菌；50%卵黄乳液可检验是否产脂酶，艰难梭菌不产生脂酶故无沉淀环。
四、实验结果：
1.按使用方法制备培养基，接种以下质控菌株，放置35℃厌氧培养48小时。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
生长情况 |
其他特征 |
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艰难梭菌 |
ATCC43593 |
/ |
生长良好 |
黄色菌落，无沉淀环 |
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产气荚膜梭菌 |
ATCC13124 |
/ |
抑制 |
/ |
2.艰难梭菌在培养基上的生长情况如下图所示：
图1-1 CCFA琼脂培养基微生物质控结果
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