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改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂的使用方法和现象

徐永利
录入时间:2024-4-22 11:03:25 来源:青岛海博生物

一、 产品用途

  用于O157菌的选择性分离培养(GB/T4789.36-2008,GB4789.28-2013)。

                                       

二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

20.0

山梨醇

10.0

三号胆盐

1.5

氯化钠

5.0

中性红

0.03

结晶紫

0.001

琼脂

15.0

pH7.2±0.2 25℃

  此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果


三、试验原理:

  蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;山梨醇为可发酵的糖类;三号胆盐、结晶紫抑制革兰氏阳性菌,亚碲酸钾抑制非0157的大肠杆菌,头孢克肟抑制变形杆菌;中性红为pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。


四、试验方法:

 1.称取本品51.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷却至45℃±1℃左右时,加入一支改良山梨醇麦康凯琼脂添加剂(含头孢克肟0.01mg,亚碲酸钾0.5mg),混匀,倾入无菌平皿,备用。

 2.制备质控菌液,选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

 3.用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面用三区法或六线法划线,同时接种两个平板。


五、试验结果:

  接种以下质控菌株,36±1℃培养24-48h:

质控菌株

菌株编号

接种量

(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

金黄色葡萄球菌

ATCC6538

/

/

半定量

G≤1

/

大肠埃希氏菌O157:H7

ATCC35150

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

无色菌落,褐色中心

伤寒沙门氏菌

ATCC14028

/

/

定性

-

无色菌落

大肠埃希氏菌

ATCC25922



定性

-

粉红色菌落,周围有胆盐沉淀



六、方法的局限性:

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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