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生长速率引起的质粒不稳定



录入时间:2024-6-19 16:41:50 来源:青岛海博生物

外源质粒的存在一方面将大量消耗细胞代谢的中间产物和能量,将不可避免地降低含质粒细胞的生长速率;另一方面也将促进质粒及宿主细胞发生突变,突变的结果要么使质粒丢失,要么使质粒表达蛋白质能力下降,这体现了宿主细胞的自我保护功能,突变的结果是生长速率增加。因此在基因工程菌培养时,从严格的意义上说,不能算是纯种培养,而是含不同质粒(包括不含质粒)细胞的混合培养,它们以不同的生长速率生长,互相竞争营养物质。由于不含质粒、少含质粒或突变的细胞生长速率快,在长期的培养过程中它们将具有生长优势,比例不断增加。不含质粒细胞的生长优势,将不利于提高蛋白质产物表达水平。通过在质粒中加入选择性标记,如抗生素抗性标记,就可以抑制不含质粒细胞的生长,保证含质粒细胞占优势,提高目标蛋白质产物的表达水平。

 

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