常见问题答疑（平皿凝固和灭菌）

  本文挑选了部分客户咨询较多、反馈较多的问题以问答的形式进行答疑。

  常见问题1

  Q：为什么购买了你们的XX琼脂培养基，灭完菌倒平皿之后不凝固？

  A：在灭菌的过程中，琼脂由于密度较大，大部分的琼脂都沉积在锥形瓶底部，因此倒平皿之前应轻轻摇晃锥形瓶，使得琼脂分散均匀之后再倒平皿。

  Q：可我们是老客户，一直都是这样使用的，只有这一次出现了这样的问题，而且摇晃培养基会产生很多气泡，影响我们实验。

  A：琼脂沉积在底部是由其物理特性导致的，之前可以凝固是因为部分琼脂仍旧在上层，但如果不摇匀培养基，可以说琼脂沉积底部导致的不凝固在多次实验或多次使用之后是必然会发生的。且如果不摇匀培养基，还可能导致倒出的平皿之间凝胶强度不一致，间接导致实验结果出现差异（凝胶强度会一定程度上影响菌落形态和大小）。摇晃时不需剧烈摇晃，围绕一个轴心适当力度摇晃几次即可，产生的轻微气泡往往会贴在锥形瓶壁或在倒入平皿时直接破裂，不会影响结果观察。

  常见问题2
  Q：购买了你们公司的XX干粉培养基，自己按标签配置后培养，但是我们发现空培养之后出现杂菌，请问这是怎么造成的？
  A：我们未标注无菌干粉的干粉培养基并不是无菌的，导致空培养出现杂菌的原因较多。如果发现生长出来的杂菌在培养基的表面，可能是倒完平皿后，环境中的菌沉降在平皿表面引起的污染。如果琼脂内部长出杂菌，则可能是灭菌时热量穿透不够，培养基未能彻底灭菌，部分耐热芽孢存活后生长出来导致的污染。
  Q：是内部长菌，可是我们就是按你们标签操作的呀，怎么还会灭菌不彻底呢？
  A：市面上的灭菌仪器品类众多，不同厂家的不同程序，会导致即使设定相同的灭菌时间和温度，也会导致整体的灭菌时长不同，这会影响最终的灭菌效果。同时，如果单次灭菌批量较大，单瓶体积较多，则也会使得灭菌效果出现波动。当灭菌锅装的培养基较多，容量较满时，部分厂家的灭菌锅升温时自动排气不能完全排出冷空气，最终会导致灭菌锅内温无法达到数显的数值。大批量灭菌时，建议同时使用生物指示剂来判断灭菌的效果。

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