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Endo培养基的使用方法和现象

徐永利
录入时间:2024-8-21 10:01:53 来源:青岛海博生物

一、用途

  用于滤膜法测定生活饮用水及其水源水中的总大肠菌群。


二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

10.0

磷酸二氢钾

2.5

乳糖

10.0

无水亚硫酸钠

3.3

碱性品红

0.3

琼脂

12.5

pH7.4±0.2 25℃

  此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果。


三、试验原理:

  蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;磷酸二氢钾是缓冲剂;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;碱性品红为指示剂,具有醌式结构,呈深红色,亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色,所以制成的培养基呈淡粉红色;发酵乳糖的细菌产生乙醛,与亚硫酸钠结合,可恢复碱性品红的醌式结构,所以菌落呈深红色;沙门氏和志贺氏菌属细菌不发酵乳糖,故菌落与培养基同为淡红色或无色;琼脂是培养基的凝固剂。


四、试验方法:

  1. 称取本品39.0g,加入20ml无水乙醇和980ml蒸馏水中加热搅拌溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。

  2. 制备质控菌液,选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。

  3. 用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

  4. 36±1℃倒置培养基培养24±2小时,记录实验结果。


五、试验结果:

  接种以下质控菌株,36±1℃需氧培养22-26小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数

培养基

方法

质控评定标准

其他特征

金黄色葡萄球菌

ATCC6538

/

/

半定量

G≤1

/

大肠埃希氏菌

ATCC25922

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

紫红色菌落,有金属光泽

产气肠杆菌

CMCC(B)45103

20-200



PR≥0.5

紫红色菌落

阴沟肠杆菌

ATCC23355

20-200



PR≥0.5

紫红色菌落,有金属光泽

弗氏柠檬酸杆菌

ATCC43864

20-200



PR≥0.5

紫红色菌落,有金属光泽

伤寒沙门氏菌

ATCC14028

20-200



PR≥0.5

无色菌落


图1  Endo培养基微生物质控结果

备注:a:阴沟肠杆菌,b:弗氏柠檬酸杆菌,c:产气肠杆菌,d:大肠埃希氏菌,e:沙门氏菌,f:金黄色葡萄球菌


六、方法的局限性:

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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