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一、试验用途及原理：
该培养基用于肠球菌的选择性分离培养。
蛋白胨、胰酪蛋白胨和酵母粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子；牛胆粉可以抑制大部分革兰氏阳性菌的生长；氯化钠维持培养基均衡的渗透压；有些细菌可将七叶苷分解为葡萄糖与七叶素，七叶素与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；叠氮化钠主要抑制革兰氏阴性细菌的生长，对变形杆菌抑制效果非常显著；柠檬酸钠可抑制肠道菌的生长；琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
|
蛋白胨 |
3.0 |
|
胰酪蛋白胨 |
17.0 |
|
酵母粉 |
5.0 |
|
牛胆粉 |
10.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
七叶苷 |
1.0 |
|
柠檬酸铁铵 |
0.5 |
|
叠氮化钠 |
0.25 |
|
柠檬酸钠 |
1.0 |
|
琼脂 |
13.5 |
|
pH值7.1±0.2（25℃） |
|
三、试验方法：
1. 称取本品56.25g，加热煮沸完全溶解于1000mL蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，倾入无菌平皿，备用。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液涂布接种于待测培养基和参比培养基上。
3. 放置于恒温培养箱35℃±2℃需氧培养24h±2h，观察试验结果。
四、试验结果判断：
接种以下质控菌株，放置于35℃±2℃需氧培养24h±2h，试验结果如图1所示。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
参比或计数培养基 |
方法 |
生长情况 |
其他特征 |
|
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
褐色菌落，菌落周围变黑 |
|
屎肠球菌 |
ATCC 27270 |
10-100 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
褐色菌落，菌落周围变黑 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
TSA |
定量 |
- |
抑制 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
TSA |
定量 |
- |
抑制 |
质控菌在TSA上的计数结果：
质控菌在叠氮钠-七叶苷琼脂上的生长情况：
图1 叠氮钠-七叶苷琼脂培养基微生物质控结果
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注：本文属海博生物原创，未经允许不得转载。
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