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本文挑选了部分客户咨询较多、反馈较多的问题以问答的形式进行答疑。
常见问题1
Q:我们配制培养基为什么会出现大量沉淀？
A：部分培养基含有较为丰富的无机盐成分，在加热和灭菌的过程中很容易发生反应形成沉淀。建议配制培养基时使用去离子水、蒸馏水、纯化水，切勿使用普通自来水。但由于各单位使用的去离子水、蒸馏水、纯化水实际含有离子程度并不相同（尤其是制水机自制水）在发生此种情况时，可以尝试使用市面上的高纯度水（如屈臣氏、娃哈哈等品牌水）进行溶解。
我们也发现部分客户会自行调节pH或者添加额外的营养成分，这些都可能导致培养基突然出现大量沉淀，往往是离子之间发生了复杂的化学反应。
另有部分培养基本身含有不溶于水的物质，如TTB含有大量碳酸钙，其本身就不能够完全溶解，此种情况为正常现象，将沉淀摇匀后分装使用即可。
常见问题2
Q：我们购买的液体培养基，自己加了琼脂之后灭菌完毕非常浑浊（生长不佳），这是怎么回事？
A：虽然一般认为琼脂不提供营养成分，仅作为凝固剂帮助培养基成型。但在实际的生产过程中，由于工艺和来源等原因，琼脂还是会含有部分糖或其他杂质，这些杂质会一定程度上影响微生物的生长，影响实验结果的判断。部分含有杂质较多的琼脂，灭菌完毕后会与培养基中的离子反应，使得培养基浑浊，只要不是出现大量沉淀，一般不影响使用。部分客户自购的琼脂实际上凝胶强度较高，按照标准添加量，会使得凝固后的平皿凝胶强度过大，影响菌落的生长，这时候会造成菌落生长较小，生长较慢，回收率下降等负面影响，此时可略微降低琼脂的添加量。
尤其部分植物组织培养的液体培养基，其含有极为丰富的无机盐成分，添加琼脂或其他营养成分时，应慎重考虑，最好先少量实验，测试生长效果。
常见问题3
Q：为什么我们购买了你们的干粉培养基，灭菌完毕以后颜色偏深？
A：大多数培养基都含有丰富的营养成分，如酵母浸粉，葡萄糖，乳糖等，这些糖类、浸粉类成分容易受热焦化、酸化，绝大多数出现灭菌后颜色过深的情况都是因为灭菌时间过久、温度过高，灭菌前没有充分溶解导致的。建议客户充分加热溶解培养基后进行分装，灭菌前确保溶解后的产品没有明显的成团或成块的粉末。其次应严格按照瓶身标签的灭菌温度和时间进行灭菌，若更改灭菌时间和温度，客户应进行工艺验证。同时应注意灭菌完毕后及时将培养基从灭菌锅内取出，请勿将培养基长时间闷在灭菌锅内。
注：本文属海博生物原创，未经允许不得转载。
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