嗜冷菌、需氧芽孢数的检验-MPC琼脂

一、定义

  在《NY/T 1331-2007 乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定》标准中定义，在6.5℃条件下需氧培养10天，在MPC平板上形成可计数菌落的细菌、酵母和霉菌为嗜冷菌，在有氧条件下经80℃加热处理10min，能存活并且于36℃下培养48h在MPC琼脂平板上形成可计数的菌落总数。

二、培养基介绍

  在《SN/T 2552.4-2010 乳及乳制品卫生微生物学检验方法 第4部分：嗜冷微生物菌落计数》标准中使用培养基为平板计数牛奶琼脂，在《SN/T 1615-2005 食品和动物饲料中嗜冷微生物计数方法》标准（=ISO17410:2001标准）使用的培养基为平板计数琼脂基础加入1g/L的脱脂奶粉，在《NY/T 1331-2007 乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定》标准中使用培养基为MPC琼脂，虽然三个标准中培养基的成分名字描述有差异，但实际上配方是完全一样的，都是用PCA为基础加入1g/L的脱脂奶粉制成的MPC琼脂。

三、检验方法

  嗜冷菌检验：以上三个标准中，嗜冷菌的检验方法相同，将样品处理稀释后，直接使用MPC琼脂进行倾注，凝固后置6.5℃培养10天，计数，即为嗜冷菌的检验结果。而在《SN/T 2552.4-2010 乳及乳制品卫生微生物学检验方法 第4部分：嗜冷微生物菌落计数》标准中还增加了快速法，在21℃培养25±1h后进行计数。此方法最终结果并不是嗜冷菌的总数，但是可以做为参考指标。嗜冷菌的数量与快速法的结果是正相关的，快速计数法的结果数量高低大致可以反映样品中嗜冷菌是否会超标，这样就可以提前采取处理措施。

  需氧芽孢数检验：与嗜冷菌检验样品处理相比，增加了一步热处理，将稀释好的样品置于80℃加热10min，此步是为了杀死样品中的繁殖体，而芽孢有较强的耐热性则可以存活，加热结束后迅速用20℃以下流动水冷却，防止芽孢受到过热损伤，再使用MPC琼脂进行倾注，凝固后置36±1℃培养48±2h，计数，计算结果即为样品中的需氧芽孢数。

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