本文挑选了部分客户咨询较多、反馈较多的问题以问答的形式进行答疑。
常见问题1
Q:我们购买了XX培养基,培养时间写着18-72小时,这个应该如何把握观察时间?
A:此种情况多出现于选择性培养基中,一般要求目标菌在最短时间内生长(如18-24h),而在整个培养周期内,抑制菌都不应生长(如72h)。
常见问题2
Q:我们使用XX培养基,但是在规定时间内没有出现阳性结果,延长培养则出现阳性,请问如何判断?
A:如使用的培养基在参考标准中有明确规定的观察时间,则超时后结果无论阴阳性均是无效结果。若无硬性观察时间,则超时后的阳性结果则应考虑几种可能,首先是此菌为迟缓阳性(一般3-5天才会出现阳性结果),其次在培养过程中有杂菌污染导致的假阳性,最后则应该考虑接菌量过少或接种的鉴定培养基不能使此菌良好生长,导致生长缓慢出现的延时阳性。
常见问题3
Q:为什么我们使用了XX培养基,一开始观察结果是对的,延长培养时间后,结果变了?
A:在培养基上,细菌也会随着培养时间出现老化、衰退、自溶等情况,且不同生长阶段菌体的性状、代谢速率等都不相同,因此建议及时观察结果并记录,超过标准要求的培养时间后,则可能出现许多假阴性假阳性结果。如部分细菌,本身产酸能力较弱,培养时间延长后,产生的酸性物质被空气氧化成中性或碱性物质,其在培养基上生长的颜色就会出现变化,导致最终结果不典型,乃至于影响后续检验。
常见问题4
Q:我们购买了XX液体培养基,自己添加的琼脂,可是观察结果的时候菌落很小/回收率低/培养基灭菌完是浑浊的
A:部分液体培养基含有丰富的离子,在添加琼脂后可能会与琼脂中的杂质反应,产生少量沉淀导致培养基浑浊。由于市面上各家琼脂不同批次之间凝胶强度均有差异,因此如果购买的琼脂总是添加固定的琼脂量,有时候会导致凝胶强度过高,进而导致细菌生长效果不佳,此时建议减少琼脂添加量进行梯度测试保证使用效果。
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