一、培养基的用途及原理
用于志贺氏菌的乳糖迟缓发酵试验。
此培养基内的蛋白胨提供碳源、微生物的生长因子;氯化钠维持渗透压;溴麝香草酚蓝为pH指示剂;若细菌能发酵乳糖,则产酸使pH下降,指示剂颜色变黄;若不能发酵,则溶液颜色不变。志贺氏菌中的宋内志贺氏菌为乳糖迟缓发酵,在一般的乳糖发酵管中观察不到阳性结果,需要在5%乳糖的发酵管中诱导培养3-7天,可观察到阳性结果。
二、成分(g/L)
蛋白胨 |
2.0 |
氯化钠 |
5.0 |
溴麝香草酚蓝 |
0.024 |
乳糖 |
50.0 |
pH7.4±0.1 |
25℃ |
三、试验方法:
1.将工作菌株接种到非选择性肉汤中过夜培养或采取其他制备方法,制成约109CFU/mL的菌悬液。
2.将安瓿瓶颈掰开待用。
3. 吸取0.05mL至待测生化管内,在36±1℃培养48-72小时(阴性结果需延长3-7天逐日观察),记录实验结果。
四、生长现象及结果观察
接种以下质控菌株,在36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量/CFU |
方法 |
生长现象 |
痢疾志贺氏菌 |
CMCC(B)51252 |
>5000 |
定性 |
阴性,培养基不变色 |
宋内氏志贺氏菌 |
CMCC(B)51592 |
>5000 |
定性 |
阳性,培养基变黄 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
>5000 |
定性 |
阳性,培养基变黄 |
福氏志贺氏菌 |
ATCC12022 |
>5000 |
定性 |
阴性,培养基不变色 |
图1 5%乳糖发酵管微生物质控结果
五、方法的局限性:
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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