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5%乳糖发酵管的使用方法和现象

徐永利
录入时间:2024-10-17 16:46:35 来源:青岛海博生物

一、培养基的用途及原理

  用于志贺氏菌的乳糖迟缓发酵试验。

  此培养基内的蛋白胨提供碳源、微生物的生长因子;氯化钠维持渗透压;溴麝香草酚蓝为pH指示剂;若细菌能发酵乳糖,则产酸使pH下降,指示剂颜色变黄;若不能发酵,则溶液颜色不变。志贺氏菌中的宋内志贺氏菌为乳糖迟缓发酵,在一般的乳糖发酵管中观察不到阳性结果,需要在5%乳糖的发酵管中诱导培养3-7天,可观察到阳性结果。


二、成分(g/L)

蛋白胨

2.0

氯化钠

5.0

溴麝香草酚蓝

0.024

乳糖

50.0

pH7.4±0.1

25℃



三、试验方法:

  1.将工作菌株接种到非选择性肉汤中过夜培养或采取其他制备方法,制成约109CFU/mL的菌悬液。

  2.将安瓿瓶颈掰开待用。

  3. 吸取0.05mL至待测生化管内,在36±1℃培养48-72小时(阴性结果需延长3-7天逐日观察),记录实验结果。


四、生长现象及结果观察

  接种以下质控菌株,在36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。

质控菌株

菌株编号

接种量/CFU

方法

生长现象

痢疾志贺氏菌

CMCC(B)51252

>5000

定性

阴性,培养基不变色

宋内氏志贺氏菌

CMCC(B)51592

>5000

定性

阳性,培养基变黄

大肠埃希氏菌

ATCC25922

>5000

定性

阳性,培养基变黄

福氏志贺氏菌

ATCC12022

>5000

定性

阴性,培养基不变色


图1  5%乳糖发酵管微生物质控结果


五、方法的局限性:

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。                                                                                      

 

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