一、培养基的用途及原理
一般用于基因工程大肠杆菌的增菌培养或蛋白表达,也可用于多种细菌的增菌培养。
胰蛋白胨、酵母浸粉提供基本营养,氯化钠维持渗透压。此培养基没有选择性,营养适宜,因此也常用来活化和培养多种常见细菌,如葡萄球菌、芽孢杆菌、肠道菌等,均可生长良好。但由于培养基中的氯化钠浓度为1%,高于营养肉汤(0.5%)等一般培养基,某些细菌的生长速度会稍慢一些。
在基因工程大肠杆菌的培养中,LB肉汤是应用最广泛的培养基之一,它成分简单,对于大肠杆菌的克隆载体扩增和蛋白的表达及后续的分离纯化都很方便。在实际的使用中,常在培养基中加入目标菌携带的抗性基因对应的抗生素来达到筛选目标菌和减少杂菌污染的作用。
二、成分(g/L)
胰蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
氯化钠 |
10.0 |
pH |
7.0±0.1 |
三、配制方法
称取本品25.0g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
四、生长现象及结果观察
接种以下质控菌株,在36±1℃下培养18-24小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量/CFU |
生长现象 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
浑浊 |
大肠埃希氏菌 |
CMCC44102 |
10-100 |
浑浊 |
大肠埃希氏菌 |
DE3(BL21) |
10-100 |
浑浊 |
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