一、培养基用途：

  用于蜡样芽孢杆菌选择性増菌培养。

二、培养基成分：

三、原理：

  胰酪胨、植物胨提供氮源，维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；磷酸二氢钾为缓冲剂；氯化钠维持渗透压，添加的抗生素多粘菌素B（2.25万单位）主要可抑制革兰氏阴性菌的生长。

四、操作方法

  1、称取本品30.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装至每瓶225ml，121℃高压灭菌15min，冷却至50℃左右时，添加1支多粘菌素B（2.25万单位），摇晃均匀后，分装试管。

  2、制备工作菌悬液。

  3、接种。

  目标菌（蜡样芽孢杆菌CMCC(B) 63303）：接种10CFU-100CFU/管，接种体积不超过1mL，接种两个平型管。同时将1mL菌悬液（与试管同一稀释度）倾注平板（或适宜稀释度0.1mL涂布平板）接种两个平板，做接种量计数用。

  非目标菌（大肠埃希氏菌ATCC 25922）：接种1000CFU-5000CFU/管，接种体积不超过1mL，接种两个平型管。同时将1mL菌悬液（比待测培养基试管接种小10-100倍稀释度）倾注平板（或适宜稀释度0.1mL涂布平板）接种两个平板，做接种量计数用。

  接种后30±1℃培养24±2小时。

图一： 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础30℃培养24小时后

  30±1℃培养24±2小时后转接平板。

  目标菌（蜡样芽孢杆菌CMCC(B) 63303）：吸取10ul培养液均匀涂布或螺旋涂布到MYP平板。

  非目标菌（大肠埃希氏菌ATCC 25922）：吸取10ul培养液均匀涂布或螺旋涂布到非选择性平板上（如：TSA）。

  4、将转接后的平板置于30±1℃培养24-48小时。

图二：试管转接平板后试验现象

五、实验结果

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