一、产品用途及原理
用途:用于药品、生物制品需氧菌和厌氧菌的无菌试验。
原理:蛋白胨和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供可发酵有糖类更利于生长;L-胱氨酸和硫乙醇酸钠均能使体系处于低氧化还原电势,有利于消除菌体生长代谢过程中产生的对自身有害的过氧化物质,同时L-胱氨酸的巯基(-SH)可以中和重金属的毒性,因此可以用于带有重金属物质的无菌检验;氯化钠维持均衡的渗透压;刃天青作为氧化还原指示剂,氧化态为粉红色,还原态为无色;少量琼脂可阻止二氧化碳、氧气扩散进入培养基中。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
15.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
葡萄糖 |
5.0 |
硫乙醇酸钠 |
0.5 |
L-胱氨酸 |
0.5 |
氯化钠 |
2.5 |
刃天青 |
0.001 |
琼脂 |
0.8 |
pH值7.0-7.2(25℃) |
三、实验方法
1、称取本品30.0g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,分装试管,每管10mL,121℃高压灭菌15分钟。在高压灭菌后不要立即放至冰箱冷却,而应在室温中冷却。当试管中的培养基有1/3以上变成红色时不能使用,可通过水浴或蒸汽加热(仅可加热一次)去除红色。
2、制备质控菌液接种到TGC培养基中。
3、放置于30℃-35℃需氧培养24h-72h。
四、结果观察
接种以下质控菌株,放置于30℃-35℃需氧培养24h-72h,培养结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其它特征 |
金黄色葡萄球菌 |
CMCC(B) 26003 |
10-100 |
+++ |
在试管中呈颗粒生长 |
铜绿假单胞菌 |
CMCC(B) 10104 |
10-100 |
+++ |
在试管表层生长,浑浊 |
枯草芽孢杆菌 |
CMCC(B) 63501 |
10-100 |
+++ |
在试管表层生长,浑浊 |
生孢梭菌 |
CMCC(B) 64941 |
10-100 |
+++ |
在试管氧化层以下呈条状生长 |
产气荚膜杆菌 |
ATCC 13124 |
10-100 |
+++ |
在试管氧化层以下呈条状生长 |
图1 TGC培养基的微生物质控结果
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