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浅析MR-VP实验

王天宇
录入时间:2024-12-10 11:44:07 来源:青岛海博生物

  MR-VP实验作为微生物生化鉴定中常见的实验,各位检测工作者不可谓不熟悉。但是MR-VP实验的实验结果意味着什么,对我们认识微生物有何帮助呢?


  MR-VP实验培养基中的主要营养成分为蛋白胨和葡萄糖。绝大多数微生物都可以分解利用葡萄糖并从这个过程中获得生命活动所需要的能量。但是不同的微生物具有不同的酶系统,对葡萄糖有不同的分解利用方式,最终产生的产物也并不一致,这表现在培养基中则为培养完成后最终pH值不同。


  MR实验在一定程度上反映了细菌分解葡萄糖产酸的能力,产酸能力较强的细菌,滴加甲基红指示剂后呈红色,而产酸能力较弱的细菌,则终点pH无法使甲基红变色,因此培养基最终呈现黄色。


  而V-P实验的实验原理则是部分细菌分解葡萄糖的终产物为中性物质,如丙酮酸。丙酮酸进行缩合、脱羧生成乙酰甲基甲醇,而此化合物在碱性条件下能被氧化成二乙酰,二乙酰可以和蛋白胨中的精氨酸的胍基作用,生成红色化合物。


  通常来说,当细菌的MR实验结果为阳性时,VP实验结果为阴性,但也有少数细菌MR-VP实验都会出现阳性,如单增李斯特氏菌,蜂房哈夫尼亚菌。


  在日常的检验过程中,会发现MR阴性菌,在具有pH指示剂的培养基上,一旦培养时间过长,很容易发生不典型的反应。如阴沟肠杆菌,在EMB培养基中,其本身是能够利用乳糖的,按反应原理,其应该和大肠埃希氏菌一样产生明显的金属光泽。但实际检验中,其很有可能先有微弱的金属光泽,后金属光泽消失,菌落也变成粉红色。亦或者在部分糖发酵反应中,接种阴沟肠杆菌或产气肠杆菌,明明应该是阳性反应,可是培养基往往是一种黄色与原颜色交织的情况,很多工作者都会延长培养,可延长之后其更是变成了完全的阴性


  这恰恰是因为MR阴性菌,通常利用糖产酸的能力较差,通常为弱酸性或中性产物。这些弱酸性和中性产物又很容易被氧化,进一步导致其呈现中性乃至碱性。与此同时,大多数培养基中除了糖类,还有大量蛋白胨作为氮源促进生长。在利用蛋白胨的过程中,大量的氨基酸被释放,而细菌往往会产生多种氨基酸脱羧酶,使得氨基酸呈现碱性。最终导致了MR阴性菌短期内产酸不明显,结果不典型不易观察;延长培养后更是大量产碱导致结果完全不正确。


  因此在微生物检验工作中,MR-VP实验能让我们对细菌的生化反应有更加合理的预期和更加敏感的判断。当接种菌为MR阴性细菌时,应更加关注其在培养基上的表现,做到及时观察现象,合理做出判断,避免漏检错检的发生。


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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