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一、检验用途及原理：
用途：用于滤膜法检测水中大肠菌群。
原理：胰胨、蛋白胨可提供氮源和生长因子；酵母浸粉提供微生物需要的微量元素；乳糖为大肠菌群可发酵的糖；氯化钠稳定渗透压；磷酸氢二钾与磷酸二氢钾为培养基pH缓冲剂；硫酸十二烷基钠和去氧胆酸钠可抑制大部分革兰氏阳性菌；加入无水乙醇可以提高培养基的抑菌性；亚硫酸钠可以使碱性品红还原脱色；碱性品红为指示剂。发酵乳糖的细菌产生乙醛和酸，乙醛与亚硫酸钠和品红化合物结合变为紫红色，快速发酵乳糖的细菌使碱性品红结晶析出产生金属光泽。
二、培养基配方（g/L）：
|
胰胨 |
10.0 |
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
酵母浸粉 |
1.5 |
|
乳糖 |
12.5 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
磷酸氢二钾 |
4.375 |
|
磷酸二氢钾 |
1.375 |
|
硫酸十二烷基钠 |
0.05 |
|
去氧胆酸钠 |
0.1 |
|
亚硫酸钠 |
2.1 |
|
碱性品红 |
1.05 |
|
pH值7.2±0.2（25℃） |
|
三、试验方法：
1、称取本品48.0g，加入20mL无水乙醇和980mL纯化水中，加热溶解均匀后分装到试管中，121℃高压灭菌15分钟备用。
2、10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于试管中。
3、放置于36℃±1℃需氧培养24h±2h，观察试验结果。
四、试验结果判断：
接种以下质控菌株，放置于36℃±1℃需氧培养24h±2h。结果如图1。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
生长情况 |
其他特征 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
20-200 |
+++ |
变紫红，有金属光泽 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
20-200 |
+++ |
变紫红，有金属光泽 |
|
弗氏柠檬酸杆菌 |
ATCC 43864 |
20-200 |
+++ |
变紫红，稍有金属光泽 |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
20-200 |
+++ |
浑浊，不变色 |
|
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
100-1000 |
- |
抑制 |
图1 M-远藤氏培养基微生物质控结果
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注：本文属海博生物原创，未经允许不得转载。
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