一、抗生素简介:
抗生素,又称为抗菌素,是指由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体作用或其他活性的一类次级代谢产物,能干扰其他生物细胞发育功能的化学物质。临床常用的抗生素有微生物培养液中的提取物以及用化学方法合成或半合成的化合物。
抗生素等抗菌剂的抑菌或杀菌作用,主要是针对“细菌有而人(或其他动植物)没有”的机制进行杀伤,包含四大作用机理,即:抑制细菌细胞壁合成,增强细菌细胞膜通透性,干扰细菌蛋白质合成以及抑制细菌核酸复制转录。
大家都知道抗生素的使用要严格遵守用量规定,但是对于抗生素的威力究竟有多大,很多人并没有很直观的概念。本文主要通过实验操作的方式,直观展示抗生素对于微生物的杀伤力究竟有多大!
二、试验内容:
试验主要借助抗生素检定Ⅳ号培养基检测过程及结果进行展示。
图1 抗生素检定培养基Ⅳ号产品
1、规范制备芽孢悬液,选择合适的芽孢液量与培养基混合,保证培养后,上层培养基内和培养基表面均匀铺满一层菌苔。
2、配制抗生素溶液。具体操作如下:
(1)准确称取11.3mg莫能菌素;
(2)加入10mL备好的甲醇中,混匀,形成母液,备用;
(3)配制磷酸盐缓冲液,灭菌备用;
(4)点样液配制:量取甲醇5.94mL,缓冲液3.96mL,吸取100μL母液加入,混匀,形成点样液;
(5)取200μL点样液,滴入备好的牛津杯中,进行培养,观察结果。
图2 抗生素检定Ⅳ号培养基检测过程和结果
点样液制备过程图示:
三、结果分析
最初称取的11.3mg莫能菌素,经过溶解和稀释过程,最终滴入每个牛津杯中的含量计算如下:(0.0113/10*0.1)/10*0.2=0.00000226g。
也就是说,最终每个孔里面加入的抗生素含量为2.2μg,这个含量可以说微乎其微了,但是用量如此之少,最终抑菌效果却非常惊人,在本该长成厚厚的菌苔的平板上,抗生素所到之处,可以说寸草不生,整个杯孔及点样液扩散范围内,呈现非常透明的透明圈。
通过这一个例子,大家对于抗生素的威力究竟有多大,应该有较为直观的概念了吧。只要达到一定的用量单位,抗生素对微生物的杀伤力可以说是毁灭性的。
四、相关讨论
人们在使用抗生素药物的时候,一定要规范用量,千万不可超量服用,不能急于求成,擅自加大用药剂量,否则对人体内微生物菌群的破坏力有可能是非常严重甚至是不可逆的。对于生产抗生素类药物的厂家,在产品有效用量的把控上必须严格,不能马虎。在微生物培养相关的试验过程中,也要严格把握所用抗生素的用量。
对于培养基生产厂家,对抗生素类原料的称量更应该严格规范:
(1)不能跟一般营养类原料一样,抱有多称点或少称点无所谓的态度,要保证天平称量准确的前提下准确称量操作,对于需大批量配制计算出的数据,不能想当然地进行四舍五入,大概称取。因为这些原料的称量即使只做微乎其微的调整,也会对所培养微生物造成很大影响,微量的差别可能会造成菌落生长差,严重时可能造成菌落不能生长的情况发生。
(2)加入抗生素等敏感原料的培养基,球磨完毕后一定要彻底清洗容器,使用不同抗生素的培养基,最好能专罐专用,避免混用。
(3)实验室接触过抗生素等敏感物质的试管、烧杯、三角瓶等器皿,若要重复使用,必须经过严格冲洗,保证无抗生素残留,才能用于实验过程,以免对实验结果造成干扰。
(4)对于称量较少,较难配制的培养基,尽量使用商品化生产的合格规范的产品,避免因配制误差造成试验结果的差异。
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