芽孢染色法—实验方法

    
（1）芽孢染色法 
①准备染液。 
②染色。用芽孢菌制成涂片，干燥后加热固定，放一小块滤纸片，之后滴加数滴石炭酸复红液，微加热温染5min，冷却后用流水冲洗，用95%酒精脱色2min，水洗，再滴加碱性美蓝复染0.5min，水洗，吸干后镜检。 
    结果：菌体呈蓝色，芽孢呈红色。 
（2）改良Schaefferr-Fulton染色法 
①制备菌悬液。加1—2滴水于小试管中，用接种环挑取2—3环菌苔于试管中，搅拌均匀，制成浓的菌悬液。 
②染色。加孔雀绿染液2—3滴于小试管中，并使其与菌液混合均匀，然后将试管置于沸水浴的烧杯中，加热染色10—15min。 
③涂片固定。用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上，涂成薄膜，然后将涂片通过火焰3次温热固定。 
④脱色。水洗，直至流出的水无绿色为止。 
⑤复染。用石炭酸复红染液染色2—3min，倾去染液并用滤纸吸干残液。 
⑥镜检。干燥后用油镜观察。 
   结果：芽孢呈绿色，菌体为红色。 
（3）Schaefferr-Fulton染色法 
①制片。按常规涂片、干燥、固定。 
②染色。加数滴孔雀绿染液于涂片上，用试管夹夹住载玻片一端，在微火上加热至染料冒蒸汽并开始计时，染5min。 
③水洗。待玻片冷却后，用缓流自来水冲洗，直至流出的水无色为止。 
④复染。用石炭酸复红染液复染 !%&’。 
⑤水洗。用缓流水洗后，吸干。
⑥镜检。干后用油镜观察。 
    结果：芽孢呈绿色，菌体为红色。

 

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