免疫电镜观察病毒形态

      许多情况下，病毒颗粒与标本中其他颗粒混杂在一起，很难分辨形态。免疫电镜技术是借助抗血清与病毒颗粒特异性结合，包被病毒使之凝聚加以区别。可以观察病毒含量较少的标本是其优点。 
1、原理 
   标本中的病毒与稀释的血清中抗体结合形成抗原一抗体复合物，电镜观察。 
2、材料 
①20g/l磷钨酸（PTA）。用双蒸馏水配制20g/l磷钨酸溶液，用1mol/lNaOH校正pH值为6.8。
②涂有炭及聚乙烯醇缩 甲醛的铜网。 
③病毒相应抗血清。 
④平皿、滤纸、游丝镊子、微量毛细管，10g/l琼脂凝胶块，蜡皈。 
3、操作方法 
①取0.9ml病毒悬液，加入0.1ml稀释的病毒相应血清，37℃30min，充分反应。 
②取10g/l琼脂凝胶块，下面垫三层普通滤纸，将一滴抗原-抗体复合物悬滴在琼脂凝胶块上，将涂膜的铜网扣在悬滴表面使之漂浮。 
③在悬滴未被吸干之前取下铜网，倒转在蜡板上，立即滴加磷钨酸染液染色1min，用滤纸毛边吸干多余染液，电镜观察。 
4、结果 
   显示病毒形态、结构。 
5、注意事项 
   注意掌握抗原、抗体比例，比例适当方可形成大小合适的抗原 ; 抗体复合物。 
   
   

 

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