1、材料
①7—8d日龄的鸡胚,McCoY细胞或HL细胞。
②荧光显微镜,CO2孵箱。
③沙眼衣原体免疫荧光诊断试剂盒,吉姆萨染色液。
2、方法
(1)标本采集
①沙眼病人眼结膜标本的采集。在10%丁卡因局部麻醉下,用无菌狭长盖玻片(0.5*2cm)刮取眼结膜上的滤泡组织,置于盛有1—2ml蔗糖磷酸盐缓冲液的小玻璃瓶内,-4—20℃冰箱 内保存。
②男性尿道炎标本的采集。用无菌特制的尿道拭子伸入尿道口内2—4cm,旋转数次,抽出置于保存液中。
③女性宫颈炎标本的采集。用无菌窥阴器张开阴道口,以无菌特制的宫颈拭子深入宫颈2—3cm2,旋转数次抽出放人保存液中。分离培养时,从低温冰箱取出,加入链霉素200U、万古霉索,在4℃冰箱中处理过夜备用;也可在保存液中预先加入庆大霉素、两性霉素。
(2)鸡胚分离培养取7—8d日龄的鸡胚,用8号针头吸上述标本接种卵黄囊0.25ml,35℃温箱培养,逐日观察,将2d后死亡及9d后仍存活者予以解剖。收集卵黄囊膜并制成涂片,吉姆萨染色后油镜观察,如在涂片中找到紫红色颗粒者为阳性。如活体解剖者,可盲目传1—2代。如仍找不到细颗粒EB(原体)者为阴性。
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