粪便标本的细菌学检查——1

由于肠道中存在大肠埃希菌等很多条件致病菌，其与肠道致病菌的主要区别之一是：大多数条件致病菌可分解乳糖，而绝大多数肠道致病菌则不分解乳糖。故分离肠道致病菌多用含乳糖的弱选择性鉴别培养液（如麦康凯琼脂等）以及对大肠埃希菌等条件致病菌有较强抑制作用、而又有利于肠道某些致病菌（如沙门菌及志贺菌属）生长繁殖的强选择性鉴别培养液。 
  本实验主要介绍疑为沙门菌或志贺菌属感染者或带菌者的粪便标本（或直肠拭子）中致病菌的分离和鉴定。 
【材料】 
1、盛有粪便标本（或肛拭子）的无菌试管（作教学实验时可考虑使用伤寒沙门菌或痢疾志贺菌属与大肠埃希菌的混合菌作为模拟标本）。 
2、四硫磺酸盐（TT）增菌液、革兰阴性杆菌（GN）增菌液。 
3、麦康凯和SS琼脂平板、双糖培养液。 
4、各种生化反应培养液及试剂（可参见微生物的 自动分析及附录）。 
5、沙门菌多价“O”（A-F组）及单价“O”诊断血清、“H”因子诊断血清。 
6、志贺菌属多价及单价诊断血清。 
【操作】 
一、标本采集 
    由于粪便中细菌种类很多，故应根据检查目的的不同选择适宜的培养液或用适当方法处理，尽可能地抑制杂菌，以利于病原菌的检出。同时，采集标本时应注意以下几点： 
1、不能认为粪便中细菌含量多，粪便标本的采集就无须无菌操作。粪便标本的采集也应遵循无菌操作的原则。若便器或标本容器不洁而污染了变形杆菌，就可能影响病原菌的分离检出，甚至把污染菌误报，造成误诊。 
2、采样的时期应合适。疑似痢疾患者应在发病初期、用药前采取标本。粪便标本采集时应挑取无尿液污染的有脓血、黏液部分的粪便2—3g（液状粪便可挑取絮状物），盛于无菌容器内送检。在无法获得粪便时，可采用直肠拭子，即用灭菌棉拭子经0.9%氯化钠溶液或增菌培养液湿润后，插入肛门内)4—5cm处，轻轻转动一圈后取出，插入无菌试管或保存液中送检；疑似伤寒患者应在发病2—3周内采集粪便标本。 
3、粪便标本如不能立即送检，可将标本放入甘油盐水保存液中，或保存于冰箱内（勿超过2小时）。 
二、检查程序   
   

 

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