粪便标本的细菌学检查——2

三、方法 
1、增菌及分纯将疑为沙门菌感染患者或带菌者之粪便标本接种至TT增菌液中进行增菌；疑为痢疾患者或带菌者的粪便标本接种至GN肉汤增菌液中进行增菌，置37℃培养6—8h小时进行增菌。如果根据标本性状，估计标本中致病菌数量较多，则可省去此步，直接作分纯培养，即将标本分别直接划线接种至麦康凯及SS琼脂平板等弱强选择性培养液上，置37℃培养18—24h小时（每一个标本同时接种一个强选择性培养液和一个弱选择性培养液）。 
2、生化反应鉴定第2日观察平板上有无可疑菌落，用接种针于上述平板中挑取单个可疑菌落（无色、半透明、光滑、较小）2—3个，分别接种至2—3管双糖培养液内，置37℃培养18—24h。第3日观察细菌生长情况，根据表10—2初步鉴定细菌种类，然后取双糖培养液上 的菌落进行系列生化鉴定。 
          表     不同肠道细菌在双糖培养液培养结果（教学实验模拟标本的结果） 
     序号      上层（乳糖）   下层（葡萄糖）      动力      可能结果 
       1            +           有          大肠埃希菌 
       2            —          +             有             伤寒沙门菌 
       3            —          +             无             痢疾志贺菌 
    临床标本的检测中，根据实验结果查阅相关资料进行综一合判定。 
3、血清学最终鉴定根据双糖培养液及系列生化反应结果判断，最后利用血清学实验对细菌进行最后的确定。 
（1）如果初步鉴定结果为沙门菌属，则取双糖培养液斜面上菌苔与沙门菌多价“O”（A-F组）诊断血清作玻片凝集实验，如凝集即为沙门菌属，然后分别与A-F组的单价“O”诊断血清作玻片凝集实验定组，最后以H因子诊断血清作玻片凝集实验以定型（种），必要时可用因子诊断血清定型。 
（2）如果根据双糖培养液及系列生化反应结果判断，初步鉴定结果为志贺菌属，则取菌苔与志贺菌属多价诊断血清作玻片凝集实验以定组，必要时可用因子诊断血清定种或型。 
【注意事项】 
1、若为较典型的沙门菌生化反应，但与A-F组多价“O”诊断血清又不发生凝集反应，应考虑可能为有VI抗原的沙门菌，可将菌制成悬液以100℃加热30分钟以除去VI抗原后，再做血清学鉴定。同理，如为较典型的志贺菌生化反应又不与其多价诊断血清发生凝集，则可用同样方法加热100℃1小时以破坏其K抗原，再做玻片凝集反应鉴定之。 
2、由于志贺菌属常易发生耐药性变异，所以，临床上如分离出志贺菌属，均应常规做药物敏感性实验指导临床治疗工作。    
   

 

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