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粪便标本的细菌学检查——2



录入时间:2008-12-2 16:20:10 来源:标本

三、方法 
1、增菌及分纯将疑为沙门菌感染患者或带菌者之粪便标本接种至TT增菌液中进行增菌;疑为痢疾患者或带菌者的粪便标本接种至GN肉汤增菌液中进行增菌,置37℃培养6—8h小时进行增菌。如果根据标本性状,估计标本中致病菌数量较多,则可省去此步,直接作分纯培养,即将标本分别直接划线接种至麦康凯及SS琼脂平板等弱强选择性培养液上,置37℃培养18—24h小时(每一个标本同时接种一个强选择性培养液和一个弱选择性培养液)。 
2、生化反应鉴定第2日观察平板上有无可疑菌落,用接种针于上述平板中挑取单个可疑菌落(无色、半透明、光滑、较小)2—3个,分别接种至2—3管双糖培养液内,置37℃培养18—24h。第3日观察细菌生长情况,根据表10—2初步鉴定细菌种类,然后取双糖培养液上 的菌落进行系列生化鉴定。 
          表     不同肠道细菌在双糖培养液培养结果(教学实验模拟标本的结果) 
     序号      上层(乳糖)   下层(葡萄糖)      动力      可能结果 
       1            +           有          大肠埃希菌 
       2            —          +             有             伤寒沙门菌 
       3            —          +             无             痢疾志贺菌 
    临床标本的检测中,根据实验结果查阅相关资料进行综一合判定。 
3、血清学最终鉴定根据双糖培养液及系列生化反应结果判断,最后利用血清学实验对细菌进行最后的确定。 
(1)如果初步鉴定结果为沙门菌属,则取双糖培养液斜面上菌苔与沙门菌多价“O”(A-F组)诊断血清作玻片凝集实验,如凝集即为沙门菌属,然后分别与A-F组的单价“O”诊断血清作玻片凝集实验定组,最后以H因子诊断血清作玻片凝集实验以定型(种),必要时可用因子诊断血清定型。 
(2)如果根据双糖培养液及系列生化反应结果判断,初步鉴定结果为志贺菌属,则取菌苔与志贺菌属多价诊断血清作玻片凝集实验以定组,必要时可用因子诊断血清定种或型。 
【注意事项】 
1、若为较典型的沙门菌生化反应,但与A-F组多价“O”诊断血清又不发生凝集反应,应考虑可能为有VI抗原的沙门菌,可将菌制成悬液以100℃加热30分钟以除去VI抗原后,再做血清学鉴定。同理,如为较典型的志贺菌生化反应又不与其多价诊断血清发生凝集,则可用同样方法加热100℃1小时以破坏其K抗原,再做玻片凝集反应鉴定之。 
2、由于志贺菌属常易发生耐药性变异,所以,临床上如分离出志贺菌属,均应常规做药物敏感性实验指导临床治疗工作。    
   

 

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