血清学实验

   在细菌的血清鉴定中，最常使用的方法是凝集反应，其基本原理是细菌为颗粒性抗原，当与相应的抗体混合时，在一定浓度的电解质条件下，可出现肉眼可见的凝集现象。 
   玻片法凝集实验是用诊断血清在玻片上与待测细菌相混合，在电解质存在下，若出现肉眼可见的凝集小块即为阳性，表示该菌为所用抗体的相应细菌。此法是一种定性实验，方法简便快速，特异性强。可用于鉴定菌种及菌型。用于鉴定细菌的诊断血清有以下几种： 
1、多价诊断血清：即混合诊断血清。该血清含有两种（或型）以上细菌的相应抗体。一般用于细菌定群或初步分型。 
2、单价诊断血清仅含一种（或型）细菌的相应抗体。可用于细菌的定种（或型）。 
3、因子诊断血清细菌含有多种抗原成分，而且不同菌群细菌之间可有共同的抗原成分。因此，通过凝集吸收实验，将抗血清中的共同抗体除掉，仅含一种特异性抗体的诊断血清称为因子血清。可用于细菌分型。 
【材料】 
1、菌种猪霍乱沙门菌。 
2、诊断血清沙门菌A-E多价血清，定群的6个O群因子血清（A群-O2、B群-O4、C1群-O7、C2群-08、D群-09、E群-03、10），定型的H因子血清。 
3、其他：0.9%氯化钠溶液、载玻片等。 
【操作】 
1、取一洁净载玻片，用记号笔划两个1—1.5cm的圆圈。 
2、取1：5或1：10诊断血清一接种环置于玻片左侧圈内，在右侧圈内放一接种环0.9%氯化钠作为对照。如天气炎热，环境温度高，则应适当多取血清及0.9%氯化钠，以防试剂短时间内干涸，影响结果的观察。 
3、用接种环取待鉴定的新鲜细菌少许，分别研磨乳化于诊断血清及0.9%氯化钠内使之均匀混合。旋转摇动玻片数次，1—3分钟后观察结果。 
   按上述操作方法，依次分别做A-E多价血清定属，特异性O因子血清定群，H因子血清定型（或种）。 
【结果】 
阴性：对照侧及实验侧均匀混浊不出现凝集。 
阳性：盐水对照侧呈现均匀混浊，实验侧明显凝集。 
自凝：对照侧及实验侧均出现凝集。 
    临床标本的检测，常常还需要加作一个阳性对照。观察结果时，先观察阴性对照及阳性对照，两个对照结果均符合实验设计时，再观察实验孔。    
   

 

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