塑料板法肥达实验

【原理】同试管法。 
【材料】10*6孔塑料板，其他同试管法。  
【方法】 
1、取10*6孔塑料板1块（每排10孔，共6排），于每排第1孔左侧分别标明“H、O、 
A、B”以表示各排孔中将分别加入伤寒沙门菌鞭毛抗原（H）、伤寒沙门菌菌体抗原（O）、甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原（A）、肖氏沙门菌鞭毛抗原（B）。 
2、血清预稀释取可疑患者血清0.4ml，加至1.2ml0.9%氯化钠溶液中，混匀即得1：4稀释的血清。 
3、稀释血清：用1ml吸管从装有1.6ml1：4可疑患者血清的试管中吸取0.8ml放入塑料板每排第1孔，每孔0.2ml。再用另一吸管取1.2ml0.9%氯化钠溶液加入上述试管中作对倍稀释，即为1：8的血清，另换吸管吹吸混匀，再取0.8ml放入每排的第二孔，每孔0.2ml。如此操作至每排第6孔止。每排孔内血清原始稀释度分别为1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128。 
4、于每排第7孔各加0.9%氯化钠溶液0.2ml，作为抗原对照。 
5、加抗原于第1排各孔加伤寒沙门菌鞭毛抗原（H），于第2排各孔加伤寒沙门菌菌体抗原（O），于第3排各孔加甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原（A），于第4排各孔加入肖氏沙门菌鞭毛抗原（B），每孔均为0.2ml。加入菌液后，每孔血清又稀释1倍，故血清最终稀释度应为1：8、1：16、1：32、1：64、1：128、1：256。 
6、将塑料板轻轻来回摇动，使抗原与血清充分混匀，置室温下，15min分钟后观察结果。记录方法参见试管法。 
【注意】因塑料板法所用的抗原及血清均较试管法浓缩10倍，因此，在确定血清效价后应扩大10倍，使其与试管法结果报告一致。例如塑料板法为1：8，则报告为1：80.   
   

 

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