临床标本结核分枝杆菌检查主要有直接涂片抗酸染色、细菌培养、聚合酶链反应（PCR）、抗体检测、动物接种等多种方法。直接涂片法即取患者标本直接涂片抗酸染色后镜检，此法简便迅速，但要求标本中结核分枝杆菌量多，并要注意与非结核分枝杆菌区别。开放性肺结核患者的痰中常含有结核分枝杆菌，如取痰液直接涂片、染色镜检找到抗酸杆菌，可作初步诊断。
【材料】痰标本、载玻片、石炭酸复红染色液、3%盐酸乙醇、美蓝染色液、金胺染色液、0.5%氢氧化钠。
【方法】
直接染色法
1、收集患者清晨咳痰，用接种环挑取痰液中干酪样坏死小块或带血小块，制成厚涂片，干燥后火焰固定。
2、用过的接种环须用75%乙醇充分清洗，或放入沸水中煮沸数分钟，将接种环上的细菌杀死，然后方可在乙醇灯上进行烧灼灭菌；或者先将接种环置乙醇灯火焰旁烘烤片刻，再置于外焰中烧灼灭菌，严禁将取标本后的接种环直接放在火焰上灭菌，以防止痰液受热后突然炸裂，使尚未死亡的结核分枝杆菌随之播散。
3、将制好的涂片进行抗酸染色或金胺染色。
4、染色后将涂片置油镜下或荧光显微镜下观察，注意观察形态、排列方式及染色性。
浓缩集菌法
【报告方式】
1、直接涂片法的报告方式
-：仔细观察300个视野（观察时间不少于4分钟）未发现抗酸杆菌。
+ -：100个视野内发现1—2个抗酸杆菌。
+：100个视野内发现3—9个抗酸杆菌。
+ +：100个视野内发现10—99个抗酸杆菌。
+ + +：每个视野内发现1—9个抗酸杆菌。
+ + + =：每个视野内发现10个以上抗酸杆菌。
2\集菌涂片应按“发现抗酸杆菌”或“未发现抗酸杆菌”方式报告。
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