炭疽芽胞杆菌串珠实验

  炭疽杆菌的幼龄培养物常呈链状排列，在含有低浓度青霉素（0.05—0.5U/ml）的培养中，可以发生形态变异；由于细胞壁的合成被抑制，菌体内部渗透压高，菌体膨胀为圆球形，并相联呈串珠状，而其他需养芽胞杆菌则不出现这种现象，具有较高的鉴别意义。 
【材料】 
1、青霉素（50—100U/ml）。 
2、滤纸条（0.3cm*1.5cm）、载玻片、营养琼脂。 
3、炭疽芽胞杆菌4—6小时肉汤培养物。 
【方法】 
滤纸片法：取融化后的营养琼脂倾注平板（厚3cm），待凝固后，用小刀切成1.5cm*3.0cm的琼脂块移于载玻片上，用接种环将炭疽芽胞杆菌46小时肉汤培养物均匀地涂布于琼脂块表面，待干后，用小镊子取1张0.3cm*1.5cm的灭菌滤纸条，浸以每ml含有50—100U的青霉素液，然后横贴于琼脂块的一端，置于湿盒内，于37℃培养4—6小时取出，加盖玻片或直接用高倍镜检查。在青霉素自然扩散的一定范围内可见炭疽芽胞杆菌呈串珠状生长。 
2、琼脂薄片法 
（1）取普通琼脂加热溶化，按每毫升0.05—0.5U/ml的量加入青霉素，充分摇匀，倒人无菌平皿，其厚度为1mm左右。 
（2）待琼脂凝固后，用消毒小刀切成盖玻片大小的方块，平放在洁净无菌载玻片上。 
（3）取新鲜琼脂斜面培养物接种于肉汤内，37℃培养6小时左右并振匀的培养物一接种环种于琼脂小方块上，把载玻片放平皿中，皿内放一小团湿棉球，盖上平皿盖。 
（4）37℃温箱作用2—4小时，取出载玻片，盖上盖玻片，用低倍或高倍镜检查。 
【结果】  炭疽杆菌菌体膨胀为圆球形，并相联呈串珠状。    
   

 

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