不加热血清反应素实验采用改良VDRL抗原,即将VDRL抗原用稀释液稀释后离心沉淀,于沉淀中加入EDTA、氯化胆碱和防腐剂。EDTA可使抗原在半年内不变性,氯化胆碱可灭活补体等,使用血清可不必加热灭活。抗原不必每天配制,在4—8℃冰箱中可保存半年。
1、玻片定性实验
(1)吸取待检血清(不必灭活)0.05ml,加于玻片的圆圈中,并分散到整个圆圈。用1ml注射器专用针头吸取抗原,每份待检标本上滴加1滴,摇动玻片4分钟,观察结果。
(2)结果判断:先用肉眼观察,再用低倍显微镜(放大100倍 )观察抗原颗粒或凝集沉淀,按以下方式记录实验结果。
-:颗粒细小,分布均匀。
+ -:颗粒分布不规则,或为细小的粗糙物。
+:在显微镜下可见小块状物,均匀分布。
+ +:肉眼可见小块状物,在显微镜下可见较大的块状物,悬液清亮 。
+ + +∽+ + + +:肉眼可见大或较大的块状物。
玻片半定量实验玻片定性实验阳性[(+ +)以上]者做半定量实验,以进一步诊断。先将待检血清用0.9%氯化钠稀释成6个稀释度,即血清原液1:2、1:4、1:8、1:16、1:32,各取0.05ml稀释血清加在玻片的圆圈内,按定性实验方法操作和判定结果。
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