不加热血清反应素实验采用改良VDRL抗原，即将VDRL抗原用稀释液稀释后离心沉淀，于沉淀中加入EDTA、氯化胆碱和防腐剂。EDTA可使抗原在半年内不变性，氯化胆碱可灭活补体等，使用血清可不必加热灭活。抗原不必每天配制，在4—8℃冰箱中可保存半年。
1、玻片定性实验
（1）吸取待检血清（不必灭活）0.05ml，加于玻片的圆圈中，并分散到整个圆圈。用1ml注射器专用针头吸取抗原，每份待检标本上滴加1滴，摇动玻片4分钟，观察结果。
（2）结果判断：先用肉眼观察，再用低倍显微镜（放大100倍 ）观察抗原颗粒或凝集沉淀，按以下方式记录实验结果。
-：颗粒细小，分布均匀。
+ -：颗粒分布不规则，或为细小的粗糙物。
+：在显微镜下可见小块状物，均匀分布。
+ +：肉眼可见小块状物，在显微镜下可见较大的块状物，悬液清亮 。
+ + +∽+ + + +：肉眼可见大或较大的块状物。
玻片半定量实验玻片定性实验阳性［（+ +）以上］者做半定量实验，以进一步诊断。先将待检血清用0.9%氯化钠稀释成6个稀释度，即血清原液1：2、1：4、1：8、1：16、1：32，各取0.05ml稀释血清加在玻片的圆圈内，按定性实验方法操作和判定结果。
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