志贺菌属——微生物学检查

一、微生物学检查 
（一）标本 
    取粪便标本应挑取粪便的脓血或黏液部分，避免与尿液混合。应在使用抗生素之前采样，标本应新鲜，若不能及时送检，宜将标本保存于30%甘油缓冲盐水或专门运送培养基内。中毒性痢疾患者可取肛拭子。 
（二）分离培养与鉴定 
    将标本接种于肠道鉴别或选择培养基上，37℃孵育18—24h。挑取无色透明可疑菌落做生化反应和血清学试验，以确定其菌群（种）和菌型。 
（三）毒力试验 
    测定志贺菌的侵袭力可用Sennery试验。系将受试菌18—24h的固体培养物，以生理盐水制成9亿/ml菌悬液，接种于豚鼠眼结膜囊内。若发生角膜结膜炎，则Sennery试验阳性，表明受试菌有侵袭力。测定志贺菌的ST，可用Hela细胞或Vero细胞，也可用PCR技术直接检测其产毒基因stxA、stxB。 
（四）快速诊断法 
1、免疫染色法将粪便标本与志贺菌抗血清混匀，在光镜下观察有无凝集现象。 
2、免疫荧光菌球法：将标本接种于含有荧光素标记的志贺菌免疫血清液体培养基中，37℃孵育4—8h。若标本中含有相应型别的志贺菌存在，则生长繁殖后与荧光抗体凝集成小球，在荧光显微镜下易被检出。 
3、协同凝集试验：以志贺菌lgG抗体与Gowan葡萄球菌结合成为试剂，用来检测病人粪便中有无志贺菌可溶性抗原。 
4、胶乳凝集试验用志贺菌抗血清致敏胶乳，使与粪便中的志贺菌抗原起凝集反应。也可用志贺菌抗原致敏胶乳，来检测粪便中有无志贺茵抗体。 
5、分子生物学方法：用PCR技术、基因探针检测1.40MDa的大质粒等。 
二、防治原则 
    非特异性防治措施包括：水、食物和牛奶的卫生学监测，垃圾处理和灭蝇；隔离病人和消毒排泄物；检测发现亚临床病例和带菌者，特别是饮食从业人员；抗生素治疗感染个体。 
    志贺菌的免疫防御机制主要依靠肠黏膜表面的slgA，而slgA需由活菌作用于黏膜局部才能诱发。因此，目前致力于活疫苗的研究。主要分为3类，即减毒突变株、用不同载体菌构建的杂交株以及营养缺陷减毒株。例如，链霉素依赖株活疫苗是一种减毒突变株；环境中存在有链霉素时始能生长繁殖。将其制成活疫苗给志愿者口服后因正常人体内不存在链霉素，该sd株不能生长繁殖，但也不立即死亡，尚可有一定程度的侵袭志愿者肠黏膜而激发局部免疫应答，产生slgA。同时，血清中的lgG、lgM特异抗体也增多。sd活疫苗的免疫保护具有特异性。 目前已能生产多价志贺菌sd活疫苗。多种杂交株活疫苗也在研究之中。如将志贺氏菌的大质粒导入另一弱毒或无毒菌中，形成二价减毒活疫苗。曾被选为研究对象的有宋内志贺菌与伤寒沙门菌Ty2ia的杂交疫苗等。 
    治疗志贺菌感染的药物颇多，但此菌很易出现多重耐药菌株。同一菌株可对5-6种甚至更多药物耐药，给防治工作带来很大困难。   
   

 

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