人类免疫缺陷病毒—微生物学检查

   HIV感染早期呈病毒血症时，从病人血液、脑脊液和骨髓细胞中能分离到病毒，从血清中查到HIV抗原；在无症状的潜伏期内一般不能或很少从外周血中检测到HIV抗原。当病人进入 AIDS相关综合征或典型AIDS期，于外周血中均可查到病毒抗原、核酸及抗体。检测HIV感染者体液中病毒抗原和抗体的方法，操作方便，易于普及应用，其中抗体检测尤普通。但HIV P24抗原和病毒基因的测定，在HIV感染检测中的地位和重要性也日益受到重视。 
（一）抗体检测 
    抗体检测主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光试验（IFA）。ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原，IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测，由于HIV的全病毒抗原与其他反转录病毒有交叉反应，而且病毒是出芽释放，病毒包膜中可能带有细胞成分，与人血清中抗HLA也可发生交叉反应，易造成假阳性，如果发现阳性标本应重复一次。为防止假阳性，这类试验用于筛查抗HIV抗体，阳性者尚需进一步做蛋白印迹法（WB）确证。 
   WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HIV蛋白进行分离，再经转移电泳将不同蛋白条带转移于硝酸纤维膜上，加入病人血清孵育后，用抗人球蛋白酶标抗体染色，就能测出针对不同结构蛋 白抗体，如抗gp120、gp41、P24抗体，特异性较高。 
（二）抗原检测 
    用ELISA检测P24抗原，在HIV感染早期尚未出现抗体时，血中就有该抗原存在。由于P24量太少，阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原，来提高敏感性。 
（三）核酸检测 
    用PCR法检测HIV基因，具有快速、高效、敏感和特异等优点，目前，该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。 
（四）病毒分离 
    常用正常人外周血液分离单个核细胞，加PHA刺激并培养3—4d后，接种病人血液的单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液，2—3d后，观察病毒生长情况。如果出现CPE，特别是发现多核巨细胞，说明有病毒增殖。采用IFA法检测培养细胞中的HIV抗原，或用生化方法检测培养液中的反转录酶活性，也可通过电镜检测HIV颗粒。   
   

 

上一篇：人类免疫缺陷病毒—免疫性

下一篇：人类免疫缺陷病毒—防治原则