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中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验方法微生物指标——4,3



录入时间:2008-12-15 17:15:21 来源:青岛海博生物

5.1.4分析步骤5.1.4.1采样/淘洗/浓缩因水样中的卵囊数量很少,因此需要浓缩较大体积的水样,采样的体积取决于水样的类型:体积(L)原水    20L处理水  10OL5.1.4 .1.1 Envirochek方法A采样系统的组成a一次性使用的,孔径1um,褶聚醚矾滤纸的滤囊;b压力标定在0.21 MPa的控制阀(对于处理水来说是可任意选择的);C连接在滤囊出口的水表,能控制过滤水样的体积;d流量能达到2l/ min的蠕动泵B采样a连接滤囊以外的采样系统。b打开蠕动泵的开关,并将流量调到2l/ min。c在作业线上安装滤囊,用适当的夹子将滤囊的进口和出口固牢d记录水表上指示的体积e将采样系统连接到自来水龙头或其他水源上。于通过滤囊过滤适当体积的水样。g在过滤结束的时候,记录滤囊过滤的水样体积b将连接在水源上的采样系统取下i打开泵,尽快把滤囊放空。过滤后,要将滤囊放到4℃ 的暗处存放,一般不要超过72h C淘洗a取下滤囊进水口的乙烯栓,用量筒加110m工,左右的淘洗缓冲液到每个滤囊的外腔中b将滤囊插到带臂水平振荡器的夹钳上,滤囊的出水阀在12点钟的位置。C打开振荡器的开关,将速度设在最大速度的80%,然后将样本振荡10 mind将滤囊中的淘洗液倾注到175ml的锥形离心管中.再用110mL的淘洗缓冲液将滤囊的外腔再充满e将过滤器插到振荡器的夹钳上,这次出水阀的位置是它原来位置沿着它的轴方向转90°角。在80%的功率下,再摇10min。f重复操作步骤d,将乙烯帽小心取下,将滤囊中的淘洗液倾注到175 mL的锥形离心管中D浓缩a将装有淘洗液样本的175 mL离心管置1500g离心15min自然地减速,以免扰乱沉淀物
b用移液管小心地将上清液吸掉,使上清液刚好到沉淀物的上面为止(不要扰乱沉淀物)。
c如果压实的沉淀物体积小于或等于0.5 mL,就要加试剂水到离心管中,使其总体积为10 mL将试管置于旋转式搅拌器10s一15s,以便使沉淀物再悬浮。d如果压实的沉淀物体积大于0.5 mL,就要用式(3)确定在离心管中需要的总体积:总需要体积(mL)=沉淀物体积*10ml/0.5ml.....(3 )
   以便将再悬浮的沉淀物调整到一个0.5ml相同压实的沉淀物体积,加试剂水到离心管中,使其总体积达到仁面计算的水平。将试管旋转搅拌10s—15s,以便使沉淀物再悬浮记录这个再悬浮物的体积。5.1.4.1.2  Filta - Max方法A采样a将滤芯(螺栓头朝下)安装在支架上,拧紧盖子(盖子即为进样口)b将过滤装置连接到需采样的水源注1:为使液体流经滤芯斋在顶部施加0.05MP。的压力。推荐的0.05MPa工作压力形成的液体流速为3l/min—4L/min。工作压力最大不应超过0.8MMPa。注2:采样时如使用导流泵、蠕动泵等泵类装置,应安装在过滤装置上游。注3:样品采集可在水源现场或实验室完成B淘洗与浓缩在淘洗与浓缩过程中,参考生产商的手动或自动淘洗装置使用手册操作。a手工淘洗步骤1)第一次淘洗。将3um滤膜放置到浓缩器中.组装好浓缩管和洗涤管。将过滤模块(滤芯)从支架上取下,安装到淘洗器的活塞顶部将淘洗器的狭口与洗涤管用决接头连接。拉下淘洗器的延伸臂至锁住,从过滤模块上去除螺栓。再连接上不锈钢虹吸管。向浓缩管注人600 mL PBST缓冲液,随后连接到快接头上将活塞上下活动20次,以冲洗解压的过滤模块拆下浓缩管,挤压活塞5次以清除过滤器中的残留液体。2)第一次淘洗液浓缩将浓缩管与磁性搅拌棒连接,放置在磁性搅拌盘上,以60r/min一12r/min搅拌。将真空泵连接到浓缩器上,形成压力为13. kPa —0.0 kPa的真空。打开活栓,使流出液浓缩到30 mL——40 ml。将浓缩液轻轻倒人50 mL离心管中。3)第二次淘洗浓缩管中重新加人600 mL PBST缓冲液,再连接到洗涤管上。重复第一次淘洗过程,只需10次。4)第二次淘洗液浓缩。将第一次的浓缩液加人到第二次的淘洗液中按上述方法重复浓缩过程。5)将3um滤膜转移到提供的袋子中,加人5 m1PBST缓冲液,隔着袋子用手轻轻磨擦滤膜。如此,清洗2次。将清洗液与浓缩液混合。b自动淘洗步骤1)第一次淘洗。将3um滤膜放置到浓缩器中,组装好浓缩管和洗涤管。打开自动淘洗器电源。将过滤模块从支架上取下,安装到淘洗器的活塞顶部。将淘洗器的狭口与淘洗管用决接头连接。按控制面板上的F1键,卸下过滤模块上的螺栓。再连接上不锈钢虹吸管。向浓缩管注人600 mL PBST缓冲液,随后连接到快接头上。按F1键开始初次浸润,然后按F3键进行第一次淘洗。拆下浓缩管,按F4键以清除过滤器中的残留液体。2)第一次淘洗液浓缩。将浓缩管与磁性搅拌棒连接,放置在磁性搅拌盘上,以60r / min一120r/min搅拌。将真空泵连接到浓缩器上,形成压力为13.3kPa ——40.0 kPa的真空。打开活栓,使流出液浓缩到30 mL一40 ml。将浓缩液轻轻倒人50ml离心管中3)第二次淘洗。浓缩管中重新加人600 mL PBST缓冲液,再连接到洗涤管上。按F3键开始淘洗。拆下浓缩管,按F4键以清除过滤器中的残留液体。4)第二次淘洗液浓缩。将第一次的浓缩液加人第二次的淘洗液中。按上述方法重复浓缩过程。
5)将3um滤膜转移到提供的袋子中,加人5ml一PBST缓冲液,隔着袋子用手轻轻磨擦滤膜。如此,清洗2次。将清洗液与浓缩液混合。5.1.4.1.3 Fjlta一MaxXpress快速方法A采样a将过滤模块(螺栓头朝下)安装在支架上,拧紧盖子(盖子即为进样口)。b将过滤装置连接到需采样的水源。注1:为使液体流经滤膜需在顶部施加0.05MPa的压力.推荐的005MPa工作压力形成的液体流速为3L/min一4L/min。工作压力最大不应超过。SM目。注2:采样时如使用导流泵、蠕动泵等泵类装置,应安装在过滤装置上游注3样品采集可在水撅现场或实验室完成注4本方法亦适用于浊度高的水源水的采样.B淘洗采用Filta一Max xpress压力淘洗装置可使淘洗过程全自动完成。详细操作程序参见生产商使用指南将压力淘洗装置准备就绪,向缓冲液槽中加入足量的淘洗缓冲液,利用厂商提供的连接锁合将缓冲液槽与压力淘洗装置连接,确保二者之间形成良好密封。连接压缩空气源和压力淘洗装置,保证足够的空气压力和体积。打开压力淘洗装置后面的封闭阀。淘洗步骤为:a打开压力淘洗器b过滤装置进样口朝上,移开样品阻留器,连接出样口分流装置(过滤模块仍在过滤装置内)。
c将过滤装置倒转,用快接头连接到压力淘洗器上。d将50001锥形离心瓶放置在样品收集器支架上,关闭压力淘洗装置。e按控制面板的Fl键,开始自动淘洗。f淘洗结束时,打开压力淘洗装置卸下过滤装置,再拿开出样分流装置,打开过滤装置,弃掉过滤模块。g将离心瓶盖好,从样品收集器支架中取出。C浓缩a将装有淘洗液样本的500 mL离心管置2000g离心15min。漫慢地减速,以免搅起沉淀物。记录沉淀物体积。注意:勿用制动器!b离心后,用吸气装置将沉淀物上层8 mL一10 ml处的悬浮物小心吸出(吸气装置的真空应小于3.3 kPa。
   如果压实的沉淀物体积小于或等于0.5mL,将试管置于旋转式搅拌器20s,然后将样品转人Leighton管中;用lml试剂水冲洗离心瓶两次,清洗液转人同一Leighton管中d如果压实的沉淀物体积大于0.5 ml,就要用式(4)确定在离心管中需要的总体积,以便将再悬浮的沉淀物调整到相当于0.5mL压实沉淀物的体积。   总需要体积(mL)=沉淀物体积*10ml/0.5ml· · · · · · ·(4 )
   加试剂水到离心管中,使其总体积达到上面计算的水平。将试管旋转搅拌105一155,以便使沉淀物再悬浮。记录这个再悬浮物的体积   
   

 

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